中藥小分子與牛血清白蛋白的相互作用.pdf

1、藥物小分子與血清白蛋白(SA)之間的相互作用研究對(duì)闡明藥物小分子在體內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)、分配及代謝過(guò)程、解釋蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系以及開(kāi)發(fā)新藥等具有十分重要的意義。近些年來(lái)，小分子和生物大分子之間的相互作用已引起各方廣泛的關(guān)注。本文主要研究了從中藥食涼茶中提取的小分子與牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin，BSA)之間的相互作用，以從分子層面了解中藥小分子的生物學(xué)效應(yīng)和功能。本文主要結(jié)構(gòu)如下:
　　 第1章：緒論,此章簡(jiǎn)

2、要的介紹了國(guó)內(nèi)外的小分子和生物大分子相互作用的研究對(duì)象，研究?jī)?nèi)容、意義、思路、手段，以及研究過(guò)程中存在的不足。闡明了立題的依據(jù)。
　　 第2章：此章作者采用熒光光譜法，在25℃和37℃兩個(gè)溫度下，測(cè)定中藥小分子和牛血清白蛋白的相互作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示在接近人體生理?xiàng)l件下(pH=7.40)，中藥小分子與牛血清白蛋白存在靜態(tài)猝滅作用，兩者之間的相互作用引起牛血清白蛋白的最大發(fā)射峰峰位藍(lán)移；根據(jù)Stern-Volmer方程:F0/F=l

3、+Kqτ0[Q]=l+Ksv[Q]得到Ksv=5.86×104(T=298K) 4.94×104(T=310K) Kq=5.86×1012(T=298K) 4.94×1012(T=310K)，通過(guò)方程Lg((F0-F)/F)=lgK+nlg[Q]
　　 計(jì)算求得在上述兩個(gè)溫度下的表觀結(jié)合常數(shù)4.15×104(T=298K)和3.92×104(T=310K)及結(jié)合位點(diǎn)數(shù)n=1，通過(guò)熱力學(xué)方程，得出△H>0、△S>0，根據(jù)Ross的

4、結(jié)論可知兩者之間是疏水作用力,通過(guò)同步熒光光譜法在波長(zhǎng)差是15nm時(shí)，熒光峰紫移了2nm，說(shuō)明中藥小分子和BSA發(fā)生靜態(tài)結(jié)合，在波長(zhǎng)差60nm時(shí)，熒光峰沒(méi)有發(fā)生位移，由此，我們可知中藥小分子距離酪氨酸殘基較近，而距離色氨酸殘基較遠(yuǎn)。
　　 第3章：此章作者采用紫外-可見(jiàn)光譜法，在室溫條件下，利用紫外-可見(jiàn)光譜法研究了中藥小分子與牛血清白蛋白之間的相互作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明二者之間形成了復(fù)合物，兩者之間的這種結(jié)合使牛血清白蛋白發(fā)生了熒

5、光猝滅，BSA～280nm的吸收峰是其肽鏈上的色氨酸和酪氨酸的芳雜環(huán)上的π-π* 躍遷引起的，BSA～280nm的吸收峰的吸收強(qiáng)度隨小分子濃度的增加而增加，吸收峰發(fā)生紫移。BSA～230nm的吸收峰則是由肽鍵的羰基(C=O)的n-π*的躍遷所引起的，吸收峰的吸收強(qiáng)度隨著小分子濃度的增加而增加，BSA～230nm吸收峰發(fā)生紅移。
　　 第4章：此章作者應(yīng)用傅立葉紅外光譜法，在室溫條件下，應(yīng)用傅立葉紅外光譜法研究中藥小分子與牛血清白

6、蛋白之間的相互作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示中藥小分子-牛血清白蛋白復(fù)合物在1072.8cm-1出現(xiàn)一個(gè)新的紅外吸收峰，佐證了中藥小分子和牛血清白蛋白是通過(guò)靜態(tài)結(jié)合的。此外，牛血清白蛋白的酰胺I帶的吸收峰1656.8cm-1，發(fā)生了微小的紫移至1653.7cm-1,牛血清白蛋白的酰胺II帶的吸收峰1539.2cm-1，發(fā)生了微小的紅移至1542.5cm-1,BSA的酰胺III帶的吸收峰1245.1cm-1，發(fā)生了較大幅度的紅移至1255.2cm-1