靈芝生理生化研究.pdf

1、本文主要研究了靈芝發(fā)酵產(chǎn)靈芝多糖、纖維素酶及臭氧對(duì)靈芝菌絲的殺滅作用三個(gè)方面內(nèi)容。 1.通過(guò)紙層析的方法發(fā)現(xiàn)其包含有三種單糖組分：葡萄糖、果糖、甘露糖，氣相色譜分析也證明了這一點(diǎn)，特別是用SephadexG-200凝膠柱層析純化了靈芝胞內(nèi)、胞外多糖，并經(jīng)紅外光譜對(duì)其進(jìn)行了分析。同時(shí)對(duì)靈芝菌絲體氨基酸組成進(jìn)行了分析，靈芝菌絲體中共含有16種氨基酸，其中含較多脂肪族氨基酸，不含色氨酸、胱氨酸。 2.通過(guò)3，5-二硝基水楊酸比

2、色法測(cè)定了CMC酶活。經(jīng)硫酸銨鹽析并透析脫鹽后通過(guò)FPLC對(duì)靈芝所產(chǎn)纖維素酶進(jìn)行了純化，有六個(gè)峰，用紅外光譜、紫外光譜等手段進(jìn)一步分析了主要峰的性質(zhì)。對(duì)靈芝纖維素酶的氨基酸組成也進(jìn)行了分析，靈芝纖維素酶共含13種氨基酸，其中脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸較多。同時(shí)研究了pH和溫度對(duì)靈芝纖維素酶穩(wěn)定性的影響，靈芝纖維素酶在55℃時(shí)酶活最高，對(duì)溫度的穩(wěn)定性較強(qiáng)，靈芝纖維素酶在pH2.2和4.2時(shí)酶活為兩個(gè)極大值。 3.以靈芝菌絲作為研究

3、對(duì)象，測(cè)定了負(fù)離子發(fā)生器放電時(shí)間、臭氧濃度、靈芝菌絲致死率之間的曲線關(guān)系。結(jié)果表明，隨著放電時(shí)間增大，臭氧濃度變大，致死率明顯上升，到一定時(shí)間后又趨緩，在生物顯微鏡下認(rèn)真觀察了正常菌絲和被破壞菌絲形態(tài)學(xué)上的差別，在透射電子顯微鏡下觀察了菌絲的外觀結(jié)構(gòu)，用激光共聚焦掃描顯微鏡觀察了靈芝菌絲破壞前后及吖啶橙染色與不染色的形態(tài)結(jié)構(gòu)，經(jīng)低真空掃描電鏡、原子力顯微鏡觀察了臭氧處理前后靈芝菌絲細(xì)胞的變化情況，探索了臭氧對(duì)真核生物靈芝菌絲細(xì)胞破壞的機(jī)