磷酸鈣-絲膠蛋白微膠囊的制備及其性能的研究.pdf

1、微載體的概念自提出以來(lái)得到了快速發(fā)展，其中以用作藥物載體的微膠囊為代表，在腫瘤細(xì)胞的靶向及藥物的可控釋放方面顯示出了良好的應(yīng)用前景。結(jié)合實(shí)際應(yīng)用情況，目前研究中面臨的問(wèn)題還有很多如：結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性，生物相容性等。為了解決這個(gè)問(wèn)題，人們?nèi)∑渚A棄其糟粕，相繼提出了大量的制備微載體的方法，不同形式的微膠囊也受到了越來(lái)越廣泛的關(guān)注，雜化微膠囊的概念應(yīng)運(yùn)而生。隨之而來(lái)的是該雜化微膠囊的制備問(wèn)題，縱觀目前常見(jiàn)的雜化微膠囊的制備方法，或限制條件較多或制

2、備過(guò)程復(fù)雜，所以開(kāi)發(fā)出一種簡(jiǎn)單易行且條件溫和的雜化微膠囊的制備方法是工作的關(guān)鍵所在。
　　本文以天然絲膠蛋白為原料，在水溶液中以鈣離子誘導(dǎo)絲膠蛋白自組裝制得微膠囊之后，放入含有檸檬酸的磷酸鈣過(guò)飽和溶液中共培養(yǎng)不同的時(shí)間，制得雜化微膠囊。用SEM、TEM、FTIR、XRD等方法表征其基本結(jié)構(gòu)，然后通過(guò)負(fù)載模擬藥物來(lái)研究其穩(wěn)定性，通過(guò)與細(xì)胞共培養(yǎng)檢測(cè)其生物相容性，通過(guò)負(fù)載鹽酸阿霉素來(lái)研究其藥物負(fù)載能力，并通過(guò)細(xì)胞學(xué)評(píng)價(jià)研究其對(duì)腫瘤細(xì)胞

3、的抑制能力。具體研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下：
　　1.雜化微膠囊的制備及其基本結(jié)構(gòu)的表征
　　通過(guò)采用生物仿生礦化的方法，以含有檸檬酸的過(guò)飽和的磷酸鈣溶液為礦化液，在pH為7.4，溫度為37℃的條件下，制得了羥基磷灰石/絲膠蛋白雜化微膠囊，通過(guò)控制礦化反應(yīng)發(fā)生的時(shí)間3-12h，進(jìn)而調(diào)節(jié)礦化殼層的厚度。且該時(shí)間比常規(guī)的仿生礦化的效率有較大提高。通過(guò)對(duì)其表面礦化層的成分分析得出其表面的主要物質(zhì)為羥基磷灰石，通過(guò)對(duì)其熒光染色并觀察分析可以

4、得出在礦化完成之后，該雜化微膠囊仍舊保持良好的中空性，為后續(xù)的藥物負(fù)載與釋放提供了基本前提。
　　2.雜化微膠囊形成機(jī)理初探及其性能研究。
　　將絲膠蛋白微膠囊放至不含檸檬酸的礦化液中進(jìn)行研究，礦化進(jìn)程完成較慢，推斷出檸檬酸的羧基可以螯合鈣離子，且它的羥基可以和絲膠蛋白結(jié)合形成磷酸鈣結(jié)合位點(diǎn)，隨著礦化時(shí)間的增加，晶體進(jìn)一步生長(zhǎng)，形成穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。將淀粉作為模擬藥物封裝至絲膠蛋白微膠囊與雜化微膠囊中，在不同 pH和離子強(qiáng)度的情況下

5、，研究淀粉的釋放速率和累計(jì)釋放量。由此可知，因無(wú)機(jī)礦化殼層的存在，雜化微膠囊顯示出更好的穩(wěn)定性，使得模擬藥物在長(zhǎng)程性的釋放中具有一定的優(yōu)勢(shì)；通過(guò)將雜化微膠囊和細(xì)胞共同培養(yǎng)可以看出，該雜化微膠囊可以促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖，具有良好的生物相容性。
　　3.通過(guò)正交試驗(yàn)的設(shè)計(jì)得出較為合適的鹽酸阿霉素的負(fù)載條件，負(fù)載率約為28％，其釋放趨勢(shì)與模擬藥物的釋放趨勢(shì)相似，而從其細(xì)胞學(xué)評(píng)價(jià)中可以看出，在雜化微膠囊中釋放的鹽酸阿霉素的量較少，細(xì)胞的存