結(jié)構(gòu)仿生型絲膠蛋白微膠囊的制備及其應(yīng)用研究.pdf

1、自用磷脂模擬細(xì)胞膜制備微膠囊以來，微膠囊的應(yīng)用得到了快速的發(fā)展，特別是作為藥物載體在癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞的特異性靶向及對(duì)藥物的可控釋放方面具有極好的應(yīng)用前景。多肽及蛋白質(zhì)微膠囊由于其優(yōu)良的生物相容性和生物可降解性獲得了廣泛的關(guān)注，但現(xiàn)在用于制備微膠囊的方法一般過程較為繁瑣或者需要用到有機(jī)溶劑，所以開發(fā)出一種簡(jiǎn)單、易行相對(duì)環(huán)保的方法制備多肽及蛋白質(zhì)微膠囊成為了熱點(diǎn)問題之一。
　　本文以比較溫和的反應(yīng)條件，在水溶液中鈣離子誘導(dǎo)絲膠蛋白一步

2、制得微膠囊。同時(shí)研究了不同反應(yīng)條件對(duì)絲膠微膠囊形貌和尺寸的影響;用DLS、FTIR-ATR、CD、EDX、TEM等方法研究了蠶繭形絲膠蛋白自組裝過程和機(jī)理。用UV研究了蠶繭形絲膠微膠囊的穩(wěn)定性及其對(duì)模擬藥物的負(fù)載和釋放性能。具體研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:
　　1.通過控制反應(yīng)條件我們制得了球形、蠶繭形微膠囊和中空蛋白管。低絲膠蛋白濃度、中性pH及25～37℃有利于絲膠蛋白有序自組裝生成形貌均一、尺寸分布窄的微膠囊。增加震蕩速率使得絲膠微

3、膠囊尺寸減小，由220rpm震蕩速率下的中空管形轉(zhuǎn)變成150rpm震蕩速率下的蠶繭形，最后在80rpm震蕩速率下絲膠蛋白自組裝成了球形微膠囊。增加鈣離子濃度有利于絲膠蛋白自組裝成更大尺寸的微膠囊，由低鈣離子濃度下的球形轉(zhuǎn)變到高鈣離子濃度下的蠶繭形。增加蛋白分子量，我們獲得了100nm尺寸的球形絲膠微膠囊。
　　2.對(duì)蠶繭形微膠囊的組裝過程研究發(fā)現(xiàn)，絲膠蛋白大分子組裝分為三個(gè)階段，長(zhǎng)的陳化期，快速組裝期，穩(wěn)定期。CD、ATR研究表明

4、鈣離子誘導(dǎo)絲膠蛋白由無規(guī)卷曲構(gòu)象轉(zhuǎn)變成β-sheet構(gòu)象，鈣元素Mapping結(jié)果表明鈣離子在微膠囊殼層中均一分布。疏水β-sheet結(jié)構(gòu)的聚集和鈣離子與絲膠蛋白大分子的螯合共同作用誘使絲膠蛋白有序組裝。
　　3.蠶繭形微膠囊在酸性條件下比在堿性條件下更穩(wěn)定。蠶繭形微膠囊對(duì)亞甲基藍(lán)的負(fù)載率高達(dá)26.25％;在pH為7.4、溫度為37℃的PBS緩沖液中，載有亞甲基藍(lán)的蠶繭形微膠囊釋放藥物分為三個(gè)階段，前期突釋階段，中期勻速釋放階段，