10升牛初乳中IGF-I的生產(chǎn)及在大鼠腸粘膜損傷修復(fù)中的作用.pdf

1、牛初乳是指母牛產(chǎn)后2d~3d內(nèi)所分泌的乳汁。初乳中不僅含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，而且還含有大量的生物活性物質(zhì)。研究表明，IGF-I在牛初乳中大量存在，是牛初乳中最重要的促生長(zhǎng)因子。
　　本研究以牛初乳為原料制備 IGF-I，研究了離心脫脂、凝乳酶凝乳、酸醇去結(jié)合蛋白、超濾除雜蛋白的工藝條件，確定的最適條件為：在36℃，4000 r/min的條件下離心15 min制備脫脂乳；脫脂乳溫度36℃，pH6.5，木瓜凝乳酶∶料液（V∶V）為1∶5

2、0，凝乳時(shí)間40 min；制備的乳清在4℃下與酸醇溶液以體積比1∶4混合均勻，靜置30 min后離心去除IGF-Ⅰ結(jié)合蛋白。然后經(jīng)60 KD~80 KD中空纖維膜超濾去除大分子雜蛋白，再采用10 KD~20 KD去除小分子雜蛋白，確定的超濾工藝條件為料液溫度36℃，pH5.5，操作壓力0.06MP；最后采用6KD中空纖維膜超濾去除乳糖等小分子物質(zhì)，確定的最適條件為料液溫度36℃，pH8.0，操作壓力0.06MP。按照已經(jīng)建立的技術(shù)路線進(jìn)

3、行大規(guī)模的IGF-I的制備，10升初乳經(jīng)過(guò)上述工藝處理后共獲得粉狀產(chǎn)品63.02g，IGF-I相對(duì)含量為2106.3 ng/mg，IGF-I的回收率為48.79％。采用氫氧化鈉作為化學(xué)清洗劑，探索了清洗劑溫度、流量、時(shí)間等因素對(duì)膜清洗效果的影響，確定了氫氧化鈉的最佳清洗條件參數(shù)為：溫度35℃，流量為40L/h，時(shí)間為25min。建立了炎癥性腸炎（IBD）大鼠模型，以外源IGF-I干預(yù)IBD大鼠，通過(guò)對(duì)結(jié)腸組織中髓過(guò)氧化物酶和超氧化物歧化