牛初乳中乳鐵蛋白與IgG的分離純化.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、牛初乳是指奶牛產(chǎn)犢后7天內(nèi)所分泌的乳,牛初乳含有豐富的營養(yǎng)成分和多種生物活性物質(zhì)。開發(fā)出合理的分離技術(shù)路線以提取高純度高活性的天然活性蛋白質(zhì)。針對牛初乳中乳鐵蛋白(Lactoferrin,Lf)和免疫球蛋白G(ImmunoglobulinG,IgG)做了分離純化的研究,主要工作包括:初乳中Lf的單一提純;綜合提取牛初乳中的Lf和IgG;應用于離子交換的模擬移動床(SimulatedMovingBed,SMB)連續(xù)離子交換設(shè)備研制與系統(tǒng)優(yōu)

2、化。 從牛初乳中純化乳鐵蛋白,采用脫脂牛初乳作為原料,經(jīng)過添裝CM-SepharoseFastFlow陽離子交換劑的離子交換柱,初乳中Lf吸附于交換柱,通過1.6%與5.0%NaCl鹽濃度階越洗脫,獲得了96.6%的乳鐵蛋白產(chǎn)品。 從牛初乳乳清中制備乳鐵蛋白和IgG,設(shè)計了一條陰陽離子交換串聯(lián)的工藝,脫脂牛初乳通過滴加6mol/LHCl調(diào)節(jié)其pH至4.0,以5000r/min離心分離20min除去酪蛋白制得乳清,緩慢滴加

3、lmol/LNaOH回調(diào)其pH至6.8,處理后的乳清經(jīng)截留相對分子質(zhì)量為50,000超濾稀釋,經(jīng)過陰陽離子交換串聯(lián)色譜,乳鐵蛋白(Lactoferrin,Lf)吸附于CM-SepharoseFastFlow,免疫球蛋白G(ImmunoglobulinG,IgG)吸附于DEAE-SepharoseFastFlow,陽離子交換柱用C(NaCl)=0.27mol/L、0.85mol/L水溶液階越洗脫,得到純度為96.6%的Lf產(chǎn)品,陰離子交換

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