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1、5-羥基色氨酸(5-HTP)作為人體神經(jīng)代謝途徑中抵抗抑郁情緒、緩解情感性精神障礙的天然藥物替代品，近年來其市場需求越來越大。與以往的從加納籽中提取的方法相比，通過人工合成方法將更加的環(huán)保與高效。在合成5-羥基色氨酸的方法中，生物法是性價比最高的，同時也是鮮有報道的新方法。本實驗通過克隆人類的色氨酸羥化酶-2(TPH-2)基因，選用pET-28a、pET-PK、pPICZαA、pPIC3.5K四種質(zhì)粒和大腸桿菌、肺炎克雷伯桿菌及畢赤酵母
2、三種菌，共成功構(gòu)建了重組大腸桿菌pET-28A-TPH-2/BL21、重組肺炎克雷伯桿菌pET-PK-TPH-2/k.p、畢赤酵母工程菌pPICZαA-TPH-2/GS115、pPIC3.5K-TPH-2/GS115四株重組工程菌。
重組工程菌構(gòu)建成功后，分別采用不同的表達(dá)策略，測出工程菌生產(chǎn)重組蛋白色氨酸羥化酶-2的能力。其中測得重組大腸桿菌在IPTG誘導(dǎo)后表達(dá)出蛋白并沒有活性。pET-PK-TPH-2/k.p在甘油途徑
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