多西他賽載藥納米膠束的制備及其體內(nèi)外評價.pdf

1、目的：多西他賽（docetaxel，DTX）是一種新型植物堿類抗腫瘤藥，為了克服其在水中溶解度低的缺點，制備了一種能夠包載多西他賽的聚乙二醇-聚乳酸mPEG-b-PDLLA共聚物；并且對多西他賽載藥納米膠束的進行了體內(nèi)外評價。
　　方法：
　　以聚乙二醇單甲醚 mPEG和D,L-丙交酯為原料，在辛酸亞錫的催化下，開環(huán)聚合，形成嵌段聚合物。通過傅立葉變換紅外光譜(FT-IR)、核磁共振(1H-NMR)、差示掃描量熱法(DSC)

2、、MALDI-TOF-TOF-MS、氣相色譜法、電感耦合法、pH計等對聚合物mPEG-b-PDLLA進行了表征。
　　采用溶劑揮發(fā)薄膜水化法制備了包載抗癌藥物多西他賽的納米膠束（DTX-PM)。利用Malvern Nano ZS激光粒度分析儀測定其粒徑和分布；透射電鏡觀測納米膠束的形態(tài)；高效液相色譜法（HPLC）測定包封率及載藥量，并進行了質(zhì)量標準研究；通過粒徑和載藥量的測定觀察載多西他賽納米膠束的穩(wěn)定性。
　　通過細胞遷移

3、試驗、MTT法和激光共聚焦實驗考察載多西他賽納米膠束對A549細胞的增殖抑制作用。
　　裸鼠皮下接種瘤塊建立肺癌動物模型后，采用尾靜脈的方法分別給裸鼠注射葡萄糖水溶液、DTX-PM溶液及市售多帕菲?溶液，定期觀察裸鼠皮下瘤體體積大小和裸鼠體重的變化。
　　結(jié)果：
　　通過1H-NMR得出丙交酯的摩爾百分含量為17~19％，mPEG2000的摩爾百分含量為81%~83%，共聚物平均分子量在3300左右。通過紅外光譜譜圖的

4、分析證實了丙交酯和mPEG聚合形成了嵌段共聚物。MALDI-TOF-TOF-MS實驗顯示檢測峰主要在3300 Da，純化后雜質(zhì)峰明顯減少。DSC測試得到mPEG-b-PDLLA聚合物的熔點約為41.8℃，熔融焓Hm=20.3 mJ/mg。殘留量檢查的結(jié)果顯示甲苯、二氯甲烷、乙醚等有機溶劑并無殘留，丙交酯的殘留含量為1.2%，錫的殘留含量為1.521E+05μg/kg。mPEG-b-PDLLA溶于水后測得pH值為5.2。
　　多西他

5、賽納米膠束的粒徑約16 nm左右，PDI在0.1~0.2之間；透射電鏡下觀察到DTM-PM的形狀呈規(guī)則的球形。通過HPLC檢測，得出多西他賽納米膠束的包封率為（88.88±0.61）%，載藥量為（15.00±0.69）%。質(zhì)量標準研究中的含量測定方法簡便、準確度高、重現(xiàn)性好?？疾霥TX-PM的復(fù)溶穩(wěn)定性，結(jié)果顯示膠束穩(wěn)定性良好，可以滿足輸液要求。
　　MTT法結(jié)果顯示，高濃度時市售多帕菲(R)比DTX-PM具有更強的細胞增殖抑制作

6、用，而在低濃度時DTX-PM具有更強的細胞增殖抑制作用；細胞遷移試驗顯示，市售多帕菲(R)和DTX-PM均可抑制A549細胞的增殖；激光共聚膠試驗表明，膠束的入胞速度很快且能夠攝取進入細胞核。
　　給裸鼠注射葡萄糖溶液、市售多帕菲(R)溶液和DTX-PM溶液后發(fā)現(xiàn)，DTX-PM組的裸鼠腫瘤生長速度慢于市售多帕菲?組，且毒性小于市售多帕菲?組。結(jié)果表明，DTX-PM的抗肺癌作用強于現(xiàn)在臨床上使用的多帕菲(R)。
　　結(jié)論：通過