基于PVP和PDMAEMA的聚陽離子結(jié)構(gòu)對(duì)DNA遞送性能的影響.pdf

1、基于基于PVP和PDMAEMA的聚陽離子結(jié)的聚陽離子結(jié)構(gòu)對(duì)構(gòu)對(duì)DNA遞送性能的影響遞送性能的影響Structuralimpactofgraftblockcopolymersbasedonpoly(Nvinylpyrrolidone)poly(2dimethylaminoethylmethacrylate)ingenedelivery學(xué)科專業(yè)：化學(xué)工程研究生：鄭響指導(dǎo)教師：邢金峰副教授企業(yè)導(dǎo)師：王永明高級(jí)工程師天津大學(xué)化工學(xué)院二零一五年五

2、月摘要基因治療在治愈遺傳性疾病和獲得性疾病方面具有重要的應(yīng)用價(jià)值，其原理是把功能性基因遞送到靶細(xì)胞產(chǎn)生治療性蛋白或沉默致病性蛋白達(dá)到治療疾病的目的。生物安全性好和轉(zhuǎn)染效率高的基因載體是基因治療獲得臨床應(yīng)用的關(guān)鍵。基因載體分為病毒載體和非病毒載體，聚陽離子作為一類重要的非病毒載體能有效負(fù)載和遞送基因至細(xì)胞內(nèi)特定的部位。其中，聚甲基丙烯酸N，N二甲氨基乙酯(PDMAEMA)是聚陽離子基因載體研究的優(yōu)良模型。眾多研究集中于PDMAEMA的不同

3、結(jié)構(gòu)對(duì)遞送DNA性能的影響，例如接枝和嵌段共聚物被廣泛研究。但將兩者進(jìn)行對(duì)比性、系統(tǒng)性研究卻少有報(bào)導(dǎo)。本論文采用具有基因協(xié)同遞送作用的PVP作為起始鏈段，通過可逆加成斷裂鏈轉(zhuǎn)移自由基聚合（RAFT）和原子轉(zhuǎn)移自由基聚合（ATRP）兩種可控的自由基聚合法制備了基于PVP和PDMAEMA的組成相同的接枝和嵌段兩種結(jié)構(gòu)的聚合物。研究表明接枝聚合物（PgP）能更有效地壓縮pDNA，形成的納米粒比嵌段聚合物（PbP）與pDNA形成的納米粒更緊實(shí)、

4、更穩(wěn)定而且表面電荷更高。在低的NP條件下，PgP在HepG2細(xì)胞上的體外細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率不僅比PbP高而且明顯高于通用轉(zhuǎn)染試劑（Lipofectamine2000）和聚陽離子轉(zhuǎn)染界的金標(biāo)準(zhǔn)（bPEI）。進(jìn)一步比較了PgP、PbP和PEI對(duì)蛋白的吸附能力，結(jié)果表明，PgP和PbP的蛋白吸附量均低于PEI。MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明PgP和PbP均具良好的生物相容性。細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明HepG2細(xì)胞對(duì)PgPpDNA二元復(fù)合物的攝取量多于PbPpDNA