阿托伐他汀調(diào)控Notch信號通路促進(jìn)腦創(chuàng)傷大鼠腦血管再生和神經(jīng)修復(fù)的實驗研究.pdf

1、目的：研究阿托伐他汀(Atorvastatin)應(yīng)用對腦創(chuàng)傷大鼠(Traumatic BrainInjury，TBI)腦血管生成相關(guān)神經(jīng)功能、空間學(xué)習(xí)記憶能力的修復(fù)作用，并從細(xì)胞和分子水平探索其調(diào)控機(jī)制。
　　 方法：選用Wistar雄性大鼠，隨機(jī)分為假手術(shù)組、腦創(chuàng)傷+生理鹽水組、腦創(chuàng)傷+Atorvastatin治療組。其中腦創(chuàng)傷+Atorvastatin治療組傷后立即給予Atorvastatin(1mg/kg/day)，連續(xù)給

2、予14天，鹽水治療組同時給予等量生理鹽水，持續(xù)同樣時間。分別于傷后第1、4、7、14、21天利用改良神經(jīng)損傷評分法(Modified Neurological Severity Scores，mNSS)對三組大鼠分別評分，評定其行為學(xué)功能；再于傷后第21-25天，利用水迷宮評定其學(xué)習(xí)記憶功能恢復(fù)的情況。30只大鼠于傷后3小時、6小時、1天、4天、7天、14天、21天、25天從大鼠眼球后靜脈叢取血約1ml，利用流式細(xì)胞儀測定循環(huán)血中的EP

3、C數(shù)量。另取51只大鼠分成假手術(shù)組、腦創(chuàng)傷+生理鹽水組、腦創(chuàng)傷+Atorvastatin治療組，于1、4、7、14、21天斷頭法處死后即刻取腦組織采用免疫組化染色、Real-time PCR、Western Blotting等技術(shù)評定腦組織血管新生和Notch信號表達(dá)變化。
　　 結(jié)果：nNSS評分結(jié)果顯示，與生理鹽水治療組比較，阿托伐他汀治療組大鼠于傷后第14、21、25天其行為學(xué)功能得到明顯改善(P<0.05)。水迷宮檢測發(fā)

4、現(xiàn)，阿托伐他汀治療組大鼠傷后24和25天的象限百分率明顯比生理鹽水治療組大鼠升高(P<0.05)，與假手術(shù)組相比較，腦創(chuàng)傷后大鼠循環(huán)血中內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量表現(xiàn)為用藥后3小時下降，然后開始逐步升高，6小時達(dá)到峰值(P<0.05)，后逐漸回到正常水平；與生理鹽水治療對照組組比較，同一個時間點的阿托伐他汀治療組的腦創(chuàng)傷大鼠的循環(huán)血內(nèi)皮祖細(xì)胞水平明顯升高，并于治療7天后達(dá)高峰(P<0.05)，后逐漸下降，但仍然維持在一個較高水平一直持續(xù)到傷后21天

5、以上。與假手術(shù)組相比較，腦創(chuàng)傷后鹽水組、阿托伐他汀組創(chuàng)傷區(qū)周圍及傷側(cè)海馬14、21天MVD均高于于假手術(shù)組(P<0.05)；阿托伐他汀治療組傷后14天和21天創(chuàng)傷區(qū)周圍及傷側(cè)海馬DG各時間點MVD與鹽水組相比較均不同程度升高，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。免疫組化染色、Real-time PCR、western blot均發(fā)現(xiàn)腦創(chuàng)傷大鼠Notch信號通路的表達(dá)變化多樣，其中Notch1，Jagged1在傷后分別出現(xiàn)表達(dá)高峰，運(yùn)用阿托伐他

6、汀后Notch1，Jagged1均不同程度表達(dá)升高，DLL4表達(dá)降低。
　　 結(jié)論：阿托伐他汀明顯增強(qiáng)創(chuàng)傷性腦損傷大鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞的動員，促進(jìn)腦創(chuàng)傷區(qū)周圍及海馬區(qū)周圍的血管新生，改善腦創(chuàng)傷大鼠行為學(xué)功能和學(xué)習(xí)及記憶功能，腦創(chuàng)傷大鼠存在Notch信號通路的表達(dá)變化，阿托伐他汀可明顯調(diào)控Notch信號通路的表達(dá)變化，Notch信號通路的變化與TBI后繼發(fā)性神經(jīng)血管損傷與神經(jīng)功能缺失及改善相關(guān)，調(diào)控Notch信號通路的表達(dá)可能成為促