L-半胱氨酸脫巰基酶拆分DL-半胱氨酸生產(chǎn)D-胱氨酸的研究.pdf

1、D-半胱氨酸是一種重要的醫(yī)藥中間體，在醫(yī)藥、食品等領(lǐng)域有著廣泛的用途。由于D-半胱氨酸在醫(yī)藥領(lǐng)域具有不可替代的作用，使其價格遠高于L-半胱氨酸和DL-半胱氨酸。探索一種能夠有效拆分DL-半胱氨酸來獲得D-半胱氨酸的方法，具有廣闊的應用前景和工業(yè)價值。
　　 本實驗室從天然環(huán)境中篩選出一株惡臭假單胞菌TSl138，該菌能夠利用工業(yè)廢料DL-ATC生產(chǎn)L-半胱氨酸，但是由于其含有的L-半胱氨酸脫巰基酶能夠分解L-半胱氨酸，使得L-半

2、胱氨酸的積累受到了影響。
　　 本研究以L-半胱氨酸脫巰基酶為研究對象，從拆分DL-半胱氨酸的角度出發(fā)，首先，對構(gòu)建的具備表達L-半胱氨酸脫巰基酶的基因工程菌株E.coli BL21(DE3)-pET2 la(+)-CD進行了誘導表達，并優(yōu)化了其表達條件，確立了最佳菌體密度為A600=0.5、IPTG誘導濃度為20 mg/L、誘導時間為2h，在最佳條件下，酶活力為126.5 U/g；隨后，對該酶拆分DL-半胱氨酸的條件進行了優(yōu)化