乙酰膽堿及其m3受體在大鼠丘腦前核的表達(dá).pdf

1、丘腦前核（anteriorthalamicnuclei，ATN）是背側(cè)丘腦的組成部分，功能與空間學(xué)習(xí)記憶相關(guān)。乙酰膽堿(Ach)作為一種重要的神經(jīng)遞質(zhì)與其m3受體(AchRm3)在空間學(xué)習(xí)與記憶的過程中也發(fā)揮著不可替代的作用。
　　 目的:本研究應(yīng)用免疫組化技術(shù)和免疫電鏡技術(shù)，觀察膽堿能傳入纖維終末及其m3受體在Wistar大鼠丘腦前核群的表達(dá)及分布情況，探討Ach及AchRm3與學(xué)習(xí)記憶的關(guān)系，為兩者參與學(xué)習(xí)記憶提供形態(tài)學(xué)資料

2、。
　　 方法:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采用成年Wistar大鼠16只，體重200～250g，雌雄不計(jì)。經(jīng)腹腔麻醉后進(jìn)行灌注，取腦，置于固定液中4℃過夜。使用振動(dòng)切片機(jī)連續(xù)冠狀切片。分別使用乙酰膽堿轉(zhuǎn)運(yùn)體(VAchT)抗體和AchRm3抗體作為標(biāo)記物。采用免疫組織化學(xué)SABC染色法光鏡下觀察膽堿能傳入纖維終末及AchRm3在丘腦前核群的表達(dá)及分布情況;免疫電鏡下觀察丘腦前核群內(nèi)Ach纖維投射終末的形態(tài)、大小和突觸后成分。所有切片都使用NIKON

3、顯微鏡拍照，IPP圖像分析軟件進(jìn)行分析，所得數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS17.0軟件進(jìn)行配對(duì)資料t檢驗(yàn)。
　　 結(jié)果:1.膽堿能纖維終末免疫組化結(jié)果:光鏡下，丘腦前核群膽堿能傳入纖維終末在背側(cè)核(anterodorsalnucleus，AD)表達(dá)極弱，在腹側(cè)核(anteroventalnucleus，AV)表達(dá)較強(qiáng)，可見大量VAchT免疫反應(yīng)陽(yáng)性投射纖維終末，呈串珠狀，分布密集呈網(wǎng)狀，其中背內(nèi)側(cè)部(AVDM)著色較淺、分布較為稀疏，腹外側(cè)部

4、(AVVL)著色較深、分布密集。AD、AVDM、AVVL內(nèi)VAchT免疫反應(yīng)陽(yáng)性產(chǎn)物平均光密度值(A)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，陰性對(duì)照未見陽(yáng)性表達(dá)。免疫電鏡下，VAchT免疫反應(yīng)陽(yáng)性的軸突終末主要與樹突形成非對(duì)稱性和對(duì)稱性軸-樹突觸，以非對(duì)稱性居多，突觸活性點(diǎn)明顯可見，圓形小泡密集。2.AchRm3免疫組化結(jié)果:ATN內(nèi)均可見棕黃色的免疫反應(yīng)陽(yáng)性產(chǎn)物，主要為神經(jīng)元胞膜和神經(jīng)氈表達(dá)。其中AD區(qū)神經(jīng)元胞膜表達(dá)強(qiáng)，神經(jīng)氈結(jié)構(gòu)表