普通油茶餅粕與果殼中多糖的提取、活性及應(yīng)用研究.pdf

1、為揭示油茶餅粕與果殼中多糖(CCP&CFP)的結(jié)構(gòu)和活性的關(guān)系，充分利用油茶加工剩余物資源，本文開展了油茶餅粕與果殼的化學(xué)成分研究;對其中的多糖進(jìn)行了提取、分離純化、理化性質(zhì)與結(jié)構(gòu)及其體外清除自由基和降血糖活性的系統(tǒng)研究;并以油茶餅粕多糖(CCP)為原料，制備了一種可望應(yīng)用于糖尿病患者口服用的泡騰片制劑。研究結(jié)果對于揭示油茶餅粕與果殼中多糖的構(gòu)效關(guān)系、拓展油茶加工副產(chǎn)物的利用途徑、延長油茶加工產(chǎn)業(yè)鏈具有一定的理論和實(shí)際意義。主要研究內(nèi)容

2、與結(jié)論如下:
　　 (1)油茶餅粕與果殼的主要成分組成研究
　　 油茶餅粕、油茶果殼含有總糖19.65％、23.34％，表明油茶餅粕和果殼中都含有較高的總糖，可以作為活性多糖開發(fā)的來源。分離鑒定了油茶餅粕和果殼中所含的2種主要黃酮苷:分別是山奈酚-3-O-{2-O-D-木糖-6-O-L-鼠李糖}-D-葡萄糖苷(C32H38O19)和山奈酚-3-O-{2-O-半乳糖-6-L-鼠李糖}-D-葡萄糖苷(C33H40O20)。這

3、2種黃酮苷大量存在于油茶餅粕中，油茶果殼中則含量較少。油茶餅粕與果殼中這2種黃酮苷的含量比為2.00∶0.18。
　　 (2)油茶餅粕多糖的提取工藝研究
　　 分別研究了苯酚-硫酸法和DNS法測定總糖與單糖的實(shí)驗(yàn)條件。采用響應(yīng)曲面法獲得纖維素酶輔助提取油茶餅粕多糖最優(yōu)條件是:提取溫度為50℃，提取時間為3h，加酶量為0.35％。此條件下的多糖提取率為26.62％。
　　 (3)油茶餅粕與果殼多糖的純化工藝

4、　　 通過水提取-乙醇沉淀獲得油茶餅粕粗多糖收率是1.8％;油茶果殼多糖收率是1.1％。獲得了聚酰胺法脫除多糖水溶液中游離蛋白的工藝。運(yùn)用此方法多糖水溶液中的游離蛋白清除率可達(dá)80.13％，多糖損失率為13.10％，脫色率為94.40％，優(yōu)于Sevage法、三氯乙酸法。采用DEAE-5纖維素對油茶餅粕粗多糖與油茶果殼粗多糖進(jìn)行柱層析，分別獲得5個純化多糖;采用SephadexG-100葡聚糖凝膠對油茶餅粕粗多糖與油茶果殼粗多糖柱層析，

5、各獲得1個純化多糖。
　　 (4)油茶餅粕與果殼多糖的分子結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)
　　 根據(jù)得率大小選擇4個純化多糖(CCPA-3、CCPB、CFPA-3、CFPB)的分子結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)進(jìn)行深入研究:相對分子質(zhì)量（Mn）分別是10248、4736、118262和179790。單糖組成中含量較高的是氨基半乳糖、半乳糖、葡萄糖醛酸、阿拉伯糖、木糖。掃描電鏡觀察可發(fā)現(xiàn)多糖表面具有凸凹不平呈疏松的褶皺結(jié)構(gòu)、糖鏈扭曲呈纖維狀。熱力學(xué)分析表

6、明，多糖聚集性較高，在200～500℃均完全分解。
　　 (5)油茶餅粕及果殼多糖與茶多糖(TP)清除體外自由基活性對比研究。
　　 對比了油茶餅粕及果殼多糖與茶多糖(TP)清除體外自由基活性的能力，油茶餅粕多糖(CCP)與油茶果殼多糖(CFP)都具有一定的清除自由基能力，且濃度與清除力有明顯的量效關(guān)系。CCP、CFP、TP清除DPPH自由基IC50分別是1017.31μg/mL，25.31μg/mL，36.74μg/m

7、L;清除ABTS自由基的IC50分別是185.50μg/mL，11.23μg/mL,10.18μg/mL.
　　 (6)多糖的體外降血糖活性研究
　　 采用α-葡萄糖苷酶的抑制實(shí)驗(yàn)與HepG2攝取葡萄糖實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證多糖樣品的體外降血糖活性。α-葡萄糖苷酶的抑制實(shí)驗(yàn)中CCP與CFP及各分級多糖的濃度與抑制率呈現(xiàn)正相關(guān)。茶多糖，粗多糖與純化后多糖的IC50分別是:4.37μg/M1，629μg/mL，54.41μg/mL,57.

8、10μg/mL,23.15μg/mL,10.92μg/mLand11.86μg/mL。HepG2細(xì)胞消耗葡萄糖實(shí)驗(yàn)結(jié)果則表明，多糖及各純化組分濃度在0.125mg/mL時，HepG2細(xì)胞對葡萄糖消耗率相當(dāng)于對照藥二甲雙胍效果的75.08～85.06％，與同濃度下茶多糖效果基本持平。此時細(xì)胞存活率達(dá)到或者接近95.00％。構(gòu)效關(guān)系分析認(rèn)為相對分子質(zhì)量、糖鏈結(jié)合方式、糖鏈綴合蛋白與糖醛酸基團(tuán)與其體外降血糖活性有關(guān)。
　　 (7)油茶