食品營養(yǎng)強(qiáng)化劑硒蛋HPLC-ICP-MS檢測方法建立的研究.pdf

1、隨著元素形態(tài)分析的發(fā)展，人們逐漸認(rèn)識到，元素的有益或有害，不僅與其含量有關(guān)，更主要取決于元素存在形態(tài)及遷移轉(zhuǎn)化規(guī)律。硒是一種人體必需的微量元素之一，硒以無機(jī)硒(Se(Ⅳ)/Se(Ⅵ))和有機(jī)硒多種形態(tài)存在。無機(jī)硒毒性大，有機(jī)硒對人體有益，生物利用率高，主要以硒代蛋氨酸等形式廣泛存在于蛋白質(zhì)中，參與酶的合成。因此必須建立一套系統(tǒng)的硒含量與硒形態(tài)檢測分析方法，以規(guī)范富硒產(chǎn)品市場?？梢娧芯吭氐男螒B(tài)分析對于環(huán)境保護(hù)和人體健康具有重要的意義。<

2、br>　　本研究的檢驗樣品為營養(yǎng)強(qiáng)化劑硒蛋白，采用高效液相色譜與電感耦合等離子質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，建立一種快速、準(zhǔn)確、方便的硒濃度含量與硒形態(tài)測定的分析技術(shù)。本項研究的主要特點和成果有:
　　1.建立了HPLC-ICP-MS測定硒蛋白形態(tài)的方法。發(fā)現(xiàn)HamiltionX-100色譜柱對硒的分離效果最優(yōu)。硒元素校正曲線的相關(guān)系數(shù)R2＞0.999。SeCys2、SeCys、Se(Ⅳ)、SeMet、Se(Ⅵ)的檢出限分別為7.18μg/kg、

3、3.52μg/kg、5.80μg/L，11.22μg/L、6.63μg/L。
　　2.確立了比較適宜的硒蛋白形態(tài)分析提取方法，通過對比測試分析，在酸提法，水提法，酶解法三種前處理方法中，以酶解法的提取效率較高;
　　3.建立了最佳儀器分析條件，儀器的最佳試驗參數(shù)為:HPLC部分（流動相為5mmol/L的檸檬酸銨，其pH為5.5）;ICP/MS部分（質(zhì)荷比為78 m/z、射頻功率為1400 W、等離子氣流速為:18.0 L/m

4、in、霧化器流速為0.98 L/min、輔助氣流速為1.8 L/min、碰撞氣流速為60 mL/min);
　　4.經(jīng)方法學(xué)驗證。對所建立的方法進(jìn)行了方法檢出限、精密度、重現(xiàn)性等試驗，五種形態(tài)硒的檢出限分別為7.18μg/kg、3.52μg/kg、5.80μg/L，11.22μg/L、6.63μg/L;樣品加標(biāo)重復(fù)六次平行進(jìn)樣，五種形態(tài)硒的保留時間和峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別在0.41％～0.67％和1.4％～3.91％之間;五種形