自然發(fā)酵酸馬奶中酵母菌的分離鑒定及酵母菌產乳糖酶的研究.pdf

1、本研究主要是從新疆南山水西溝牧民家庭的酸馬奶中分離出25株酵母菌,并對25株酵母菌進行形態(tài)學特征觀察,生理生化,糖發(fā)酵試驗及5.8S rDNA分子生物學鑒定酵母菌得出:Kazachstania unispora10株、Kluyveromyces marxianus7株、Kluyveromyces lactis4株、Saccharomyces cerevisiae1株、Galactomyces geotrichum1株、菌株27疑似新種。

2、鑒定結果對我們進一步認識并利用傳統(tǒng)發(fā)酵乳制品中酵母菌資源具有重要意義。
　　通過含X-gal的篩選板在6株酵母菌篩選出了2株產β-半乳糖苷酶的2種菌株:K.lactis與K.marxianus,分別命名為K.lactis-ZJ14,K.marxianus-ZJ19。經過復篩后K.lactis-ZJ14表現(xiàn)出良好的產乳糖酶性能。為提高K.lactis-ZJ14產酶性能,對K.lactis-ZJ14產酶條件進行單因素優(yōu)化試驗,結果顯示

3、培養(yǎng)條件為:溫度30℃、pH7.0、接種量4％、培養(yǎng)時間18h。為了進一步提高菌株K.lactis-ZJ14產酶性能,對K.lactis-ZJ14產酶培養(yǎng)基優(yōu)化,通過采用單因素試驗、PB試驗、Box-Behnken試驗設計得出:K.lactis-ZJ14最佳液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基組分為乳糖15.74g/L、酵母膏10.31g/L、硫酸鎂4.84g/L、磷酸二氫鉀5.42g/L。此最佳培養(yǎng)條件下最大酶活性為56.76U/mL。
　　為能更好

4、的利用和保存該乳糖酶,對K.lactis-ZJ14粗酶液性質進行了研究,結果表明:該乳糖酶具有較高的低溫穩(wěn)定性,粗酶液在4℃條件下保存30d后,酶活力是原酶活性的80%以上;該乳糖酶在35~45℃范圍內活力較高,最適反應溫度35℃;此酶在溫度在20~55℃下具有耐受性,酶在20~45℃范圍內處理2h后,殘留酶活均在90%以上,在55℃下處理2h其殘留酶活為71%;該粗酶液在pH6.0~8.0范圍內活力較高,其最適反應pH7.0,在pH6