經(jīng)前期綜合征肝氣逆、郁兩證動(dòng)物模型改進(jìn)及肝失疏泄微觀機(jī)制初探.pdf

1、目的：針對(duì)前期工作中大鼠個(gè)體差異對(duì)造模結(jié)果干擾及模型宏觀評(píng)價(jià)半定量打分法不夠客觀缺點(diǎn)，采用曠場(chǎng)法篩選得分相近大鼠進(jìn)入實(shí)驗(yàn)減小誤差并以該法評(píng)價(jià)模型大鼠宏觀表現(xiàn)，為情志病證動(dòng)物模型宏觀評(píng)價(jià)提供客觀有效方法；針對(duì)前期工作中獼猴層級(jí)模式判別不夠精確及模型評(píng)價(jià)量表考核指標(biāo)不夠理想難題，引入獼猴社會(huì)層級(jí)模式判別標(biāo)準(zhǔn)化方案規(guī)范前期研究并疊加社會(huì)應(yīng)激因素，按照量表制作規(guī)范流程改進(jìn)《雌性實(shí)驗(yàn)獼猴情緒評(píng)價(jià)量表》；以所研制量表為工具進(jìn)一步開(kāi)展雌性實(shí)驗(yàn)獼猴表情

2、行為與體內(nèi)相關(guān)神經(jīng)介質(zhì)、性激素及其調(diào)節(jié)激素水平變化相因性研究，為揭示肝疏泄失?，F(xiàn)代機(jī)理，提供實(shí)驗(yàn)資料與科學(xué)解釋。 方法：應(yīng)用行為學(xué)判定結(jié)合改良陰道涂片法確定大鼠動(dòng)情周期，采用晝夜顛倒配合曠場(chǎng)法篩選行為學(xué)得分相近大鼠進(jìn)入實(shí)驗(yàn)減小誤差，調(diào)整造模刺激強(qiáng)度及持續(xù)時(shí)間，應(yīng)用晝夜顛倒配合曠場(chǎng)法對(duì)模型大鼠宏觀表現(xiàn)予以量化評(píng)價(jià)；采用30分鐘成組隨意觀測(cè)及獼猴社會(huì)層級(jí)模式判別標(biāo)準(zhǔn)化方案規(guī)范獼猴實(shí)驗(yàn)方法并疊加社會(huì)應(yīng)激因素，按照量表制作規(guī)范流程并運(yùn)用

3、視覺(jué)可視化標(biāo)尺技術(shù)改進(jìn)《雌性實(shí)驗(yàn)獼猴情緒評(píng)價(jià)量表》開(kāi)展獼猴模型宏觀表現(xiàn)量化評(píng)價(jià)。 結(jié)果：曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中，相較正常對(duì)照組大鼠造模后逆模組水平得分、垂直得分及曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)總分均顯著增加(P<0.05)，而郁模組大鼠則顯著減少(P<0.05)，用藥后這一趨勢(shì)得到明顯糾正(P<0.05)。大鼠模型微觀指標(biāo)檢測(cè)方面，肝氣逆證模型大鼠不同腦區(qū)NE、DA、5-HT含量均有上升趨勢(shì)；肝氣郁證模型大鼠不同腦區(qū)DA含量呈下降趨勢(shì)，5-HT含量顯著上升。外周

4、單胺類(lèi)神經(jīng)介質(zhì)變化趨勢(shì)多與中樞相反。肝氣逆證模型大鼠癥狀呈現(xiàn)期血清E<,2>和P含量均呈下降趨勢(shì)，肝氣郁證模型大鼠血清E<,2>和P含量亦較正常對(duì)照組明顯降低。中樞內(nèi)激素變化與血清中相反。修訂后量表主要考核指標(biāo)較前大幅改善。憤怒、抑郁、快樂(lè)、恐懼因子重測(cè)信度系數(shù)分別為：0.90、0.92、0.95、0.92；分半信度為：0.96、0.79、0.87、0.97；效標(biāo)關(guān)聯(lián)效度系數(shù)為：0.93、0.74、0.61、0.68，P值均小于0.05

5、；憤怒、抑郁、快樂(lè)、恐懼因子全國(guó)常模分別為：21.35±5.13、17.96±4.88、12.68±2.26和21.25±4.47。應(yīng)用量表研究獼猴模型宏觀表情行為與體內(nèi)微觀指標(biāo)變化相因性發(fā)現(xiàn)：肝氣逆證獼猴模型5-HT含量與憤怒情緒呈非典型負(fù)相關(guān)，隨5-HT含量增加，憤怒情緒積分呈下降趨勢(shì)，但當(dāng)5-HT含量上升到一定程度時(shí)，憤怒情緒積分反而上升。P含量增加，憤怒情緒積分呈下降趨勢(shì)，前期下降較快，后期下降較慢。 結(jié)論：大鼠、獼猴模

6、型均較好模擬了PMS病證臨床表現(xiàn)及病理變化，造模方法成熟可靠，具有較好可信度及可重復(fù)性；應(yīng)用曠場(chǎng)法可明確鑒別肝氣逆、郁兩證大鼠模型，為證候動(dòng)物模型中醫(yī)辨證提供直接依據(jù)；改進(jìn)后《雌性實(shí)驗(yàn)獼猴情緒評(píng)價(jià)量表》考核指標(biāo)結(jié)果良好，達(dá)到應(yīng)用要求，使用該量表可明確判別肝氣逆、郁兩證獼猴模型。分析動(dòng)物模型整體表現(xiàn)與相應(yīng)微觀指標(biāo)變化，兩者密切相關(guān)，表明中醫(yī)“肝疏泄失?！辈糠治⒂^機(jī)制：肝疏泄太過(guò)所致煩躁易怒等表現(xiàn)可能與下丘腦、邊緣葉NE、DA、5-HT水平