膠原蛋白止血海綿的研制.pdf

1、膠原蛋白或稱膠原是動物體內(nèi)含量最豐富的蛋白質(zhì),在動物體內(nèi)起支持、保護、連接等多種作用。目前,膠原已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)醫(yī)藥工業(yè)、食品工業(yè)、日用化學(xué)品工業(yè)、生物合成及膠原修飾等領(lǐng)域。
　　本文以牛腱(T)為原料,利用無花果酶(F)和胃蛋白酶(P)提取膠原,重點研究膠原的提取及提純工藝,實驗表明,當(dāng)提取實驗的溫度為4℃,物料比分別達(dá)到F:T=1:25和P:T=1:10時,膠原的提取效果最好,產(chǎn)率可達(dá)到77％左右。采用精過濾、高速離心、鹽析及

2、透析等工藝對膠原進(jìn)行提純,發(fā)現(xiàn)精過濾的效果略好于高速離心,鹽析的最佳工藝為:氯化鈉濃度3mol/L,鹽析時間為36小時,透析的最佳時間應(yīng)不少于7天。通過紅外光譜,紫外光譜及氨基酸自動分析儀將所提取的蛋白質(zhì)定性為膠原;通過SDS-PAGE凝膠電泳測試出所提取的膠原蛋白分子量大于300kDa,且純度較高;通過透射電子顯微鏡觀察到了膠原在溶液中的纖維狀形態(tài)。
　　選擇戊二醛為交聯(lián)劑交聯(lián)膠原,制備膠原蛋白海綿,通過紅外光譜發(fā)現(xiàn)所使用的交聯(lián)

3、劑濃度并沒有破壞膠原分子結(jié)構(gòu),使膠原發(fā)生變性;DSC、TG測試表明膠原材料的熱收縮溫度和分解溫度分別上升了13℃和11℃;掃描電鏡測試表明經(jīng)過戊二醛交聯(lián)后海綿的微孔結(jié)構(gòu)逐漸減少,結(jié)構(gòu)趨于更加規(guī)整和致密;測試交聯(lián)海綿的物理性質(zhì)發(fā)現(xiàn),交聯(lián)導(dǎo)致膠原的吸水率及孔隙率下降,對溶出液的pH值影響不大。通過改變海綿制備過程中的溶液酸度、預(yù)凍溫度、膠原濃度及預(yù)凍時間,研究以上參數(shù)對膠原海綿微觀結(jié)構(gòu)的影響,結(jié)果表明,預(yù)凍溫度及膠原溶液的酸度是影響海綿微觀