電針干預(yù)胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)下AD模型大鼠的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本研究是以PI3K胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑為基礎(chǔ)，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)觀察針刺對(duì)胰島素抵抗(IR)的干預(yù)作用;以自發(fā)性胰島素抵抗模型-OLETF大鼠為動(dòng)物模型，用RT-PCR、Western blotting等檢測(cè)方法，檢測(cè)指標(biāo)空腹血糖(FPG)、血漿胰島素(FINS)、C肽、腦脊液胰島素，以觀察針刺干預(yù)對(duì)OLETF大鼠海馬中IRS-2、PI3K、Akt、GSK的mRNA和蛋白表達(dá)的改變，以及大鼠海馬中Aβ的沉淀以及Tau蛋白mRNA改變的情況，由分子生

2、物學(xué)水平探討針刺改善胰島素抵抗的機(jī)制原理。
　　目的:
　　以自發(fā)性胰島素抵抗模型OLETF大鼠為研究對(duì)象，在此動(dòng)物模型基礎(chǔ)上建立AD模型，觀察針刺（穴選百會(huì)、腎俞、內(nèi)關(guān)、足三里、三陰交）對(duì)AD模型大鼠中樞胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)的影響，初步探討針刺對(duì)AD模型大鼠中樞胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)PI3K通路各組成蛋白（IRS-2，PI3K，Akt，IDE，GSK-3α/β，Aβ，Tau）表達(dá)的作用，從中樞胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的角度闡釋針灸治療AD的機(jī)

3、理。
　　方法:
　　選用自發(fā)性胰島素抵抗OLETF大鼠和同品系LETO大鼠，以O(shè)LETF大鼠為基礎(chǔ)建立AD模型。造模方法采用腹腔注射D-半乳糖和灌胃AlCl3溶液的方法建立AD模型。D-半乳糖采用60mg·kg-1·d-1，AlCl3采用50mg·kg-1·day-1，按照10ml/kg溶液體積配置溶液。連續(xù)造模60天，造模完成后用Morris水迷宮進(jìn)行行為學(xué)測(cè)試，剔除不合格模型。以LETO大鼠為正常組，將造模成功的OLE

4、TF大鼠隨機(jī)分為模型組和針刺組，每組8只。針刺組給予針刺干預(yù)，穴選百會(huì)、腎俞（雙）、內(nèi)關(guān)（雙）、足三里（雙）、三陰交（雙），連續(xù)治療三周。治療結(jié)束后，檢測(cè)所有大鼠空腹血糖(FPG)、血漿胰島素(FINS)、血清C-肽(C-P)，和海馬中的IRS-2、PI3K-p85α、Akt2、IDE、GSK-3α/β，以及海馬中的Aβ含量、tau蛋白。
　　結(jié)果:
　　針刺干預(yù)的EA-AD-OLETF組大鼠的FPG、FINS、C-P較模型

5、AD-OLETF組顯著降低(P＜0.01)。
　　Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中，模型AD-OLETF組較正常LETO組穿越原平臺(tái)象限時(shí)間占總時(shí)間百分比減小(P＜0.01);針刺EA-AD-OLETF組較模型組則顯增大(P＜0.05)。
　　海馬中的IRS-2、PI3K-p85α、Akt2、IDE、GSK-3α/β針刺作用后，其mRNA變化不明顯，但是其相關(guān)的p-IRS-2、IDE、p-GSK-3β蛋白在干預(yù)后有了明顯的提升(P＜

6、0.01，P＜0.05)，p-PI3K-p85α、p-Akt2蛋白較干預(yù)前有所降低(P＜0.05)。
　　在針刺干預(yù)后，針刺組EA-AD-OLETF組大鼠海馬中Aβ沉淀細(xì)胞的個(gè)數(shù)較AD-OLETF組明顯減少(P＜0.05)。針刺干預(yù)后的EA-AD-OLETF大鼠海馬Tau mRNA表達(dá)比AD-OLETF升高(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　從針刺干預(yù)胰島素抵抗角度治療AD，可以明顯改善模型大鼠胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)，并且改善