胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)下大鼠心肌細(xì)胞葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4變化的研究.pdf

1、胰島素抵抗是高血壓病、糖尿病、高脂血癥等疾病的重要的病理生理基礎(chǔ)，是體內(nèi)代謝紊亂重要的表現(xiàn)和發(fā)病機(jī)制。糖尿病性心肌病變是心肌細(xì)胞代謝紊亂所致。葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4分布在骨骼肌細(xì)胞和心肌細(xì)胞內(nèi)，是心肌細(xì)胞葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)的重要的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。最近的研究表明，在胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)下，骨骼肌細(xì)胞內(nèi)的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4的表達(dá)水平下降。但目前在胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)下對心肌細(xì)胞的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4的表達(dá)水平的研究甚少。 實(shí)驗(yàn)材料與方法： 取雄性Wistar大鼠

2、(由中國醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物研究中心提供)30只，以隨機(jī)的方式分成對照組、高脂組、高脂高糖組，分別給予基礎(chǔ)飲食：蛋白質(zhì)21％、脂肪19％、碳水化合物60％，高脂飲食：蛋白質(zhì)21％、脂肪60％、碳水化合物19％、高脂高糖飲食：蛋白質(zhì)21％、脂肪60％、碳水化合物19％、額外加蔗糖40克；喂養(yǎng)8周以建立胰島素抵抗大鼠模型，以“鉗夾技術(shù)”檢測胰島素抵抗的存在，并計算出葡萄糖攝取率。檢測后取大鼠動脈血5ml，以取上清液，用酶聯(lián)免疫方法檢驗(yàn)血糖；處死

3、實(shí)驗(yàn)大鼠，取心肌標(biāo)本，以4％多聚甲醛固定，時間在24小時之內(nèi)，經(jīng)系列脫水、透明、浸臘后常規(guī)石蠟包埋，進(jìn)行原位雜交的方法檢測心肌細(xì)胞葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4mRNA的表達(dá)水平。對陽性細(xì)胞的著色率進(jìn)行計數(shù)，所有測得指標(biāo)連續(xù)分布計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±s)表示，進(jìn)行方差分析并進(jìn)行組間的兩兩比較；進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，并對指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)分析。所有的統(tǒng)計分析由SPSS軟件包完成。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 1、體重 高脂組與高脂高糖組Wistar大

4、鼠的體重明顯高于對照組(P<0.05)，高脂高糖組大鼠的體重高于高脂組(P<0.05)； 2、血糖 在對照組、高脂組、高脂高糖組大鼠的血糖無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)； 3、葡萄糖攝取率對照組大鼠葡萄糖的攝取率明顯高于高脂組和高脂高糖組(P<0.05)，而高脂組的葡萄糖攝取率又高于高脂高糖組(P<0.05)； 4、GLUT4 mRNA在大鼠心肌細(xì)胞上的表達(dá)在對照組大鼠心肌細(xì)胞GLUT4 mRNA的表達(dá)明顯

5、高于高脂組和高脂高糖組(P<0.05)，高脂組的GLUT4 mRNA的表達(dá)明顯高于高脂高糖組(P<0.05)； 5、相關(guān)性分析葡萄糖攝取率和大鼠的體重呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=-0.849(P<0.05)；GLUT4mRNA在心肌細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)和葡萄糖攝取率呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=0.819(P<0.05)。 結(jié)論： 1、高脂飲食和高脂高糖飲食喂養(yǎng)大鼠8周可建立可靠的胰島素抵抗模型。 2、胰島素抵抗可導(dǎo)致心肌細(xì)胞