青菜衰老和短期逆境處理的早期檢測指標研究.pdf

1、本論文以青菜(Brassica rapa var chinensis)為實驗對象，選用不同方法檢測葉片衰老過程中各指標變化，從而找出能表現(xiàn)葉片衰老的先期指標，并對篩選出的指標進行葉片逆境忍受程度的實驗。具體實驗結(jié)果如下:
　　(1)通過使用不同的光譜方法檢測青菜葉片衰老過程的各項指標。使用葉綠素熒光測定儀檢測青菜衰老過程中的熒光參數(shù)，發(fā)現(xiàn)0-1d青菜的非光學猝滅系數(shù)qN和NPQ有顯著變化，可作為無損檢測青菜衰老的早期指標。其次是紫

2、外分光光度計積分球無損檢測青菜，可以發(fā)現(xiàn)次早期的1-2d青菜的顯著差異。近紅外光譜無損檢測青菜葉綠素含量的方法是可行的，可以代替?zhèn)鹘y(tǒng)測定方法大批量無損快速檢測青菜葉綠素。
　　(2)青菜熱乙醇的提取液使用熒光分光光度計測定。在激發(fā)波長434nm，發(fā)射波長673 nm檢測熒光強度，是0-1d的青菜早期衰老檢測最佳指標;其次激發(fā)波長255 nm，發(fā)射波長347nm檢測熒光強度，也可以檢測0-1d的青菜顯著變化。激發(fā)波長255nm，發(fā)射

3、波長512nm檢測熒光強度，可以作為1-2 d的青菜次早期衰老檢測指標。
　　(3)分別選用鉀、鈣、鈉、氯離子和氨電極檢測青菜葉片衰老過程中每天的離子滲漏情況，發(fā)現(xiàn)氯、鉀離子溶出總量大，并且主要是細胞膜內(nèi)溶出;鈉、鈣、銨離子次之。鈉、鈣離子和氨早期有大量溶出，說明其在細胞間隙大量存在。鈣離子在細胞外以結(jié)合態(tài)存在，鈣離子胞外溶出變化大，說明細胞壁成分有早期變化。葉片衰老時，各種離子溶出顯著增加。鈣離子電極在0-1d的青菜上升的靈敏度

4、最高，最適合早期測定青菜衰老。銨離子在1-2 d，以及其后溶出最顯著。青菜衰老中細胞內(nèi)溶出的金屬離子以鉀電極測定最為顯著。
　　(4)通過靜態(tài)頂空-氣質(zhì)聯(lián)用、未酯化和酯化的氣質(zhì)聯(lián)用測定青菜葉片揮發(fā)性物質(zhì)，發(fā)現(xiàn)靜態(tài)頂空-氣質(zhì)聯(lián)用和未酯化的氣質(zhì)聯(lián)用法檢測出的青菜葉片揮發(fā)性成分不足10種，而樣品酯化后測出了多達50種揮發(fā)性成分，說明樣品需要酯化后才能準確測出質(zhì)膜成分。0-1d青菜的亞麻酸、亞油酸、棕櫚酸、7，10，13-十六碳三烯酸、油

5、酸-β--烯-豆甾醇酯和葉綠醇，出現(xiàn)了顯著性的變化，可以作為青菜衰老早期指標。1-2 d青菜的乙酸-β-谷甾醇、棕櫚油酸也出現(xiàn)顯著變化，可以作為次早期檢測指標。但氣質(zhì)檢測的缺點是樣品需要破壞、提取、酯化，還需要高檔儀器。
　　(5)通過高效液相色譜法測定青菜衰老過程中游離氨基酸的變化，發(fā)現(xiàn)賴氨酸0-1d大量上升，上升了1.76倍，1-2d出現(xiàn)高峰，后下降。門冬氨酸和脯氨酸反而隨著青菜衰老出現(xiàn)下降，其放置1d就有很大的下降。但青菜脯

6、氨酸含量很少，容易漏檢。因此，門冬氨酸和賴氨酸可能適合作為青菜衰老的早期指標。
　　(6)通過以上三種方法選出葉綠素熒光測定儀和鉀離子溶出作為最容易檢測的指標，對青菜短期逆境忍受能力進行實驗，發(fā)現(xiàn)青菜失水20％以下基本正常，很耐失水，且高溫和低溫極限分別為46℃和1℃。10％乙醇處理，青菜葉片正常，20％乙醇已經(jīng)有不良影響。0.1％乙酸處理，青菜的qN和NPQ顯著上升，啟動光合作用抗逆境機制。0.6％以上乙酸處理青菜的葉綠素熒光參