氣相色譜法在藥物殘留溶劑測定中的應(yīng)用研究.pdf

1、藥物中的殘留溶劑系指在原料藥或輔料的生產(chǎn)中，以及在制劑制備過程中使用的，但在工藝過程中未能完全去除的有機溶劑。藥品制備環(huán)節(jié)中，選擇適當(dāng)?shù)娜軇┛商岣吆铣稍纤幃a(chǎn)量或改變藥物的性質(zhì)，如晶型、純度、溶解度等。因此有機溶劑是合成反應(yīng)中必不可少、非常關(guān)鍵的因素。
　　藥品殘留溶劑沒有療效，它的存在具有潛在性的藥物毒性危險，例如苯就是一種能引發(fā)白血病的致癌物,它會導(dǎo)致很多類型的血癌或血液的原發(fā)性癌癥。國際醫(yī)藥界和管理部門逐漸重視藥品中的殘留溶

2、劑，從 ICH及各國歷版藥典對殘留溶劑檢測方法的修訂內(nèi)容來看,需要控制的有機溶劑種類從最初的幾種發(fā)展為現(xiàn)在的幾十種，《中國藥典》2010年版和2015年版明顯增加了殘留溶劑的質(zhì)量要求。
　　氣相色譜法具有靈敏度高、選擇性好的特點，可以分析復(fù)雜的樣品,是分析藥品中的殘留溶劑最為合適的方法。氣相色譜分為：直接進(jìn)樣氣相色譜、頂空氣相色譜和固相微萃取氣相色譜。
　　《中國藥典》2010年版和2015年版中多種原料增加了殘留溶劑檢查項

3、目，同時，多種殘留溶劑的檢驗方法相近或相同。
　　本文考察了十五種抗生素藥品生產(chǎn)工藝中經(jīng)常使用的原材料、有機溶劑，并根據(jù)藥典各品種正文項下列入的殘留溶劑的種類，明確了常用的需測定控制的殘留溶劑共17種。本文采用頂空氣相色譜法首次建立一個統(tǒng)一高效的殘留溶劑測定方法，在同一色譜條件下，可以同時測定多個抗生素藥品中多種殘留溶劑，用于企業(yè)實驗室日常內(nèi)控檢驗中，該方法預(yù)計可以將工作效率提高30％以上，同時減少人力、儀器購買資金的投入，為抗生

4、素制藥企業(yè)大大降低檢驗成本。
　　本文采用氣相色譜法，建立了阿莫西林中殘留 N,N-二甲基乙酰胺的分析方法；建立了頭孢米諾鈉中殘留三氯甲烷的分析方法；建立了巖藻黃質(zhì)中殘留乙醇與乙酸乙酯的分析方法。實現(xiàn)了對多種藥物殘留溶劑的高靈敏度測定。
　　第一部分藥品殘留溶劑檢驗方法的建立與研究
　　目的：建立一個氣相頂空色譜法，可以同時檢測多個藥品中的多種殘留溶劑（甲醇、乙醇、乙腈、丙酮、異丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙酸丁酯、甲酯

5、、吡啶、甲苯、四氫呋喃、正丙醇、正丁醇、乙醚、環(huán)己烷、甲基異丁基酮）。
　　方法：以頂空氣相色譜法，選擇不同極性的毛細(xì)管柱，分別考察了極性色譜柱HP-FFAP、中極性色譜柱DB-624及非極性色譜柱HP-1三種色譜柱對17種殘留溶劑的分離效果，對比內(nèi)標(biāo)法、外標(biāo)法兩種定量方式的可行性，篩選出HP-1為色譜柱，外標(biāo)法，建立頂空氣相色譜法，采用FID檢測器，對十五種藥品中的15種殘留溶劑進(jìn)行測定。
　　結(jié)果：在上述色譜條件下，15

6、種殘留溶劑可以有效分離，經(jīng)過方法學(xué)驗證，在濃度范圍內(nèi)線性良好（r均大于0.99），回收率均在80%~120%之間，RSD均小于10%。
　　結(jié)論：該方法快速、準(zhǔn)確、專屬性強，適用于同一個色譜條件下同時測定多個藥品中多種殘留溶劑，提高檢測效率。
　　第二部分阿莫西林中殘留N,N-二甲基乙酰胺檢驗方法的建立
　　目的：選擇合適的進(jìn)樣方式，及適合不溶于水藥物阿莫西林的溶解介質(zhì)，采用氣相色譜法測定該原料藥中高沸點有機溶劑N,N

7、-二甲基乙酰胺殘留量。
　　方法：以氣相色譜法，對比頂空進(jìn)樣和液體直接進(jìn)樣兩種進(jìn)樣方式，考察阿莫西林以及N,N-二甲基乙酰胺在水、甲醇、乙酸乙酯中的溶解性，篩選出合適的進(jìn)樣方式和溶解介質(zhì)，采用DB-WAX毛細(xì)管柱，F(xiàn)ID檢測器，測定藥品中殘留N,N-二甲基乙酰胺的含量。
　　結(jié)果：選用甲醇為溶解介質(zhì)，用適量甲醇浸泡待測樣品30min，以使樣品中的 N,N-二甲基乙酰胺完全浸出，再以3000轉(zhuǎn)/分的速度離心約20min，取上清

8、夜，做為待測溶液。以液體直接進(jìn)樣方式進(jìn)行分析。
　　所建毛細(xì)管氣相色譜法經(jīng)方法學(xué)驗證：被測組分線性良好，相關(guān)系數(shù)為r=0.9995，回收率為99.4%，RSD為1.0%。
　　三批樣品中N,N-二甲基乙酰胺最大殘留量為0.024%。
　　結(jié)論：N,N-二甲基乙酰胺能溶于甲醇，以甲醇作為萃取溶劑。所建立的氣相色譜法靈敏度高、專屬性強，適于阿莫西林中殘留 N,N-二甲基乙酰胺的限度檢測。
　　第三部分頭孢米諾鈉中殘留

9、三氯甲烷檢驗方法的建立
　　目的：選擇合適的溶劑介質(zhì)，利用毛細(xì)管氣相色譜法，實現(xiàn)對頭孢米諾鈉中易揮發(fā)性有機溶劑三氯甲烷的高靈敏度測定。
　　方法：對比水、甲醇、二甲基亞砜對三氯甲烷的溶解性，并根據(jù)被檢測藥物的溶解性，選擇適合的溶劑介質(zhì)。用 DB-624毛細(xì)管柱和FID檢測器檢，頂空進(jìn)樣法檢測頭孢米諾鈉中殘留三氯甲烷。
　　結(jié)果：稱取三氯甲烷約150mg，放入裝有少許甲醇的50 mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，作為對照品儲

10、備液。精密量取4μl對照品儲備液，加入裝有2ml純化水的20ml頂空瓶中，作為對照品溶液。以純化水為溶解介質(zhì)制備供試品溶液。所建毛細(xì)管氣相色譜法經(jīng)方法學(xué)驗證：被測組分線性良好，相關(guān)系數(shù)為r=0.9995，回收率為95.0%，RSD為1.1%。
　　三批樣品中三氯甲烷最大殘留量為0.0012%。
　　結(jié)論：先用甲醇將三氯甲烷溶解，制備對照品儲備液。然后吸取微量對照品儲備液溶于純化水中，制備對照品溶液。所建立的頂空氣相色譜法靈敏

11、度高、專屬性強，適于頭孢米諾鈉中三氯甲烷的限度檢測。
　　第四部分巖藻黃質(zhì)中殘留溶劑檢驗方法的建立
　　目的：建立頂空毛細(xì)管氣相色譜法測定巖藻黃質(zhì)中殘留溶劑。
　　方法：采用HP-1毛細(xì)管柱和FID檢測器檢測。采用程序升溫：柱溫40℃保持5min，以10℃/min升至150℃，保持2min；檢測器溫度250℃；進(jìn)樣口溫度200℃；頂空進(jìn)樣測定。
　　結(jié)果：在上述色譜條件下，所建立的檢測方法經(jīng)驗證：各組分線性關(guān)系良