表皮生長因子聯(lián)合促肝細(xì)胞生長因子體內(nèi)誘導(dǎo)動(dòng)員后自體骨髓干細(xì)胞治療大鼠糖尿病的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　 聯(lián)合應(yīng)用表皮生長因子與促肝細(xì)胞生長因子體內(nèi)誘導(dǎo)動(dòng)員后的自體骨髓干細(xì)胞，探討能否使其轉(zhuǎn)分化為胰島素分泌細(xì)胞，觀察該方法對(duì)STZ大鼠糖尿病的治療作用。
　　 方法:
　　 一、分組及造模40只SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、糖尿病組、動(dòng)員組及誘導(dǎo)組，每組10只，后3組均用鏈脲佐菌素(STZ)制做糖尿病大鼠模型，腹腔注射2％STZ溶液(55mg/Kg)，對(duì)照組腹腔注射等容積檸檬酸緩沖液。注射后3、7d后取尾靜脈血

2、測(cè)定隨機(jī)血糖，血糖＞16.7mmol/L為STZ糖尿病大鼠。
　　 二、動(dòng)員及誘導(dǎo)成模后動(dòng)員組和誘導(dǎo)組皮下注射重組人粒細(xì)胞集落刺激因子10μg/kg·d，連續(xù)15天，對(duì)照組和糖尿病組同樣注射等容積生理鹽水。誘導(dǎo)組于動(dòng)員第二日腹腔注射表皮生長因子1ug/kg·d、促肝細(xì)胞生長因子0.3mg/kg·d，連續(xù)14天；其他3組腹腔注射等容積生理鹽水對(duì)照。實(shí)驗(yàn)前各組大鼠測(cè)血糖、空腹血清胰島素值(ELISA法)、體重，實(shí)驗(yàn)開始后每周測(cè)一次體

3、重，測(cè)一次血糖。4周后結(jié)束實(shí)驗(yàn)，測(cè)定空腹血清胰島素值。處死大鼠，開腹腔取胰腺、肝和脾，用于免疫組織化學(xué)染色（SABC法，小鼠抗大鼠胰島素抗體），經(jīng)MetaMorph/EvolutionMP5.0/BX51圖像采集分析系統(tǒng)對(duì)大鼠組織中胰島素陽性細(xì)胞進(jìn)行分析。
　　 結(jié)果:
　　 一、生化檢測(cè)結(jié)果治療前，糖尿病組、動(dòng)員組及誘導(dǎo)組大鼠血糖、血清胰島素?zé)o顯著性差異。治療后1周、2周、3周、4周時(shí)，誘導(dǎo)組大鼠血糖低于糖尿病組及動(dòng)員

4、組(P＜0.05)，高于對(duì)照組(P＜0.05)，糖尿病組及動(dòng)員組之間無明顯差異(P＞0.05)；治療后1周、2周、3周、4周時(shí)，誘導(dǎo)組大鼠血清胰島素高于糖尿病組及動(dòng)員組(P＜0.05)，低于對(duì)照組(P＜0.05)，糖尿病組及動(dòng)員組之間無明顯差異(P＞0.05)；整個(gè)實(shí)驗(yàn)中對(duì)照組大鼠體重始終高于其它各組(P＜0.05)，其他各組間體重?zé)o明顯差異(P＞0.05)。
　　 二、免疫組織化學(xué)及圖像分析結(jié)果實(shí)驗(yàn)終止時(shí)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)各組

5、大鼠胰腺中胰島素陽性細(xì)胞百分比，對(duì)照組明顯高于其他各組(P＜0.01)，誘導(dǎo)組低于對(duì)照組但是明顯高于糖尿病組(P＜0.01)、動(dòng)員組(P＜0.01)，而動(dòng)員組與糖尿病組無顯著性差異(P＞0.05)。在誘導(dǎo)組的肝臟和脾臟中發(fā)現(xiàn)少量胰島素染色陽性細(xì)胞表達(dá)，其他各組肝臟和脾臟中均未發(fā)現(xiàn)胰島素染色陽性細(xì)胞表達(dá)。
　　 結(jié)論:
　　 1、表皮生長因子聯(lián)合促肝細(xì)胞生長因子體內(nèi)可誘導(dǎo)動(dòng)員后自體骨髓干細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為胰島素分泌細(xì)胞.