版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、水通道蛋白(AQP)對水具有極高的滲透性,有可能在仿生廢水回收以及海水淡化等領(lǐng)域具有潛在的重要應(yīng)用價值。本論文的研究目標是對來源于深海嗜壓菌Photobacterium profundum SS9的潛在水通道蛋白基因(aqpSS9)進行在多種異源表達體系中進行表達,并分析其可能的生物學(xué)功能。
首先利用生物信息學(xué)分析表明,AqpSS9肽鏈一級結(jié)構(gòu)與大腸桿菌AqpZ的同源性高達67%,內(nèi)含水通道蛋白的2個NPA保守序列,具有6
2、個跨膜結(jié)構(gòu),從而具有強烈疏水特性,預(yù)測將整合在細胞膜上,有可能是一種新型的水通道蛋白。
采用PCR方法從P.profundum SS9細菌基因組擴增得到AqpSS9的編碼基因,構(gòu)建成功表達載體pUC19-AqpSS9和pSJ2-AqpSS9,轉(zhuǎn)化大腸桿菌,形成大腸桿菌MM/pUC19-AqpSS9和MM/pSJ2-AqpSS9。然后將這二種基因工程菌與AqpZ-改造菌MM1211(aqpZ-)在低滲條件下分別進行混合培養(yǎng),
3、以觀察重組菌與改造菌的生長競爭現(xiàn)象。實驗發(fā)現(xiàn)重組菌對改造菌有極明顯的生長競爭優(yōu)勢,兩者菌量比值最高可達32倍,從而間接鑒定了AqpSS9具有一定的水透過功能。
進一步對AqpSS9在大腸桿菌中的表達條件進行優(yōu)化。在優(yōu)化了誘導(dǎo)條件(包括誘導(dǎo)時間、培養(yǎng)溫度、IPTG濃度、誘導(dǎo)后培養(yǎng)時間)下,E.coli Rossetta(DE3)對AqpSS9的活性表達效率最高,AqpSS9表達量達48 mg/L。
最后,為有效
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 抗輻射菌lexA基因及其表達蛋白質(zhì)生物學(xué)功能的研究.pdf
- 南極深海底泥中性嗜鹽菌chromhalobactersp.njs2四氫嘧啶生物合成基因ectabc的克隆表達及四氫嘧啶生物學(xué)功能初步研究
- 水通道蛋白3和水通道蛋白9在功能性便秘結(jié)腸粘膜的表達及意義.pdf
- 嗜熱菌水聚糖酶基因的克隆、表達及酶學(xué)性質(zhì)研究.pdf
- 特發(fā)性羊水過多中水通道蛋白8和水通道蛋白9的表達和意義.pdf
- 水通道蛋白9在人肝癌組織中的表達及意義.pdf
- Ezrin蛋白在皮膚癌組織中的表達及生物學(xué)功能.pdf
- ss9型電力機車中修驗收范圍及標準
- 滲透壓對大腸埃希菌水通道蛋白G1pF基因表達的影響.pdf
- Bt水稻及其外源基因表達蛋白的環(huán)境行為與生物學(xué)效應(yīng).pdf
- 艱難梭菌毒素A功能區(qū)基因的克隆、表達及其生物學(xué)特性.pdf
- 嗜水氣單胞菌噬菌體的生物學(xué)特性及基因組學(xué)研究.pdf
- 深綠木霉蛋白酶基因SS42異源表達及重組蛋白生防特性分析.pdf
- 水通道蛋白AqpSS9的無細胞表達和功能表征.pdf
- 香菇轉(zhuǎn)錄本功能域蛋白LatcripiN-9的表達、純化及生物學(xué)活性研究.pdf
- 傷寒沙門菌sufC基因及t4606基因的生物學(xué)功能分析.pdf
- 嗜肺軍團菌類真核效應(yīng)蛋白的系統(tǒng)發(fā)生及生物學(xué)功能研究.pdf
- 19761.嗜熱纖梭菌singleton蛋白cthe2751的結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究和雙功能酶fkp的初步結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究
- 日本血吸蟲TOR基因克隆表達及生物學(xué)功能研究.pdf
- ZBTB蛋白家族成員-ZBTB9的生物學(xué)功能初探.pdf
評論
0/150
提交評論