左心輔助裝置致心梗早期心肌卸負(fù)荷后心肌細(xì)胞及miRNA變化的研究.pdf

1、目的：
　　左心輔助裝置雖已大量使用于終末期心衰患者，但能否應(yīng)用于心梗患者尚存在爭議。為此我們制作了羊急性心梗模型，驗(yàn)證左心輔助裝置卸負(fù)荷干預(yù)下心梗心肌細(xì)胞壞死減少的假設(shè)；基于成立的假設(shè)，對大量存活的冬眠心肌細(xì)胞，借助高通量測序技術(shù)，較全面的發(fā)現(xiàn)缺血、缺氧條件下的冬眠心肌細(xì)胞miRNA的變化，希望對心梗后miRNA以及心肌細(xì)胞保護(hù)的研究有所幫助。
　　方法：
　　6只成年小尾寒羊經(jīng)結(jié)扎冠狀動脈制作心梗模型，其中實(shí)驗(yàn)組3

2、只在心臟不停跳下植入左心輔助裝置（FW-Ⅱ型軸流泵）,其余3只為對照組不作卸負(fù)荷處理。記錄心梗后12、24、36、48、72小時(shí)CTnⅠ值評價(jià)心肌細(xì)胞損傷程度。72小時(shí)后取出標(biāo)本，病理檢查觀察心肌細(xì)胞破壞及炎癥細(xì)胞浸潤情況，TUNEL法檢測兩組動物心肌細(xì)胞凋亡情況。將實(shí)驗(yàn)組、對照組的心肌組織分為心梗、梗死邊帶區(qū)域、正常區(qū)域三種樣品。根據(jù)每種樣品中 miRNA的歸一化表達(dá)量，計(jì)算樣本間Pearson相關(guān)系數(shù)；利用皮爾遜相關(guān)系數(shù)，評價(jià)樣本間

3、的相關(guān)性，通過高通量檢測技術(shù)，檢測中心肌細(xì)胞miRNA，并在三種樣品間進(jìn)行對比，發(fā)現(xiàn)期間miRNA的變化情況。
　　結(jié)果：
　　卸負(fù)荷后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組CTnⅠ值變化幅度均較對照組有差異，病理發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組心梗及梗死邊帶區(qū)域炎癥細(xì)胞浸潤較少，壞死心肌細(xì)胞較少，大量心肌細(xì)胞呈冬眠細(xì)胞狀態(tài)存活；而對照組對應(yīng)區(qū)域炎癥細(xì)胞浸潤廣泛，壞死心肌細(xì)胞較多。TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組梗死邊帶區(qū)域心肌細(xì)胞凋亡程度低于對照組（47.83

4、±16.24％對75.80±11.16%，P<0.05）。通過計(jì)算樣本間Pearson相關(guān)系數(shù)，認(rèn)為樣品的重復(fù)性達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)，并表明同種類樣品間的關(guān)聯(lián)性好，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)合理，對以上三種樣本通過高通量miRNA測序，并兩兩間比較表明，共有53種已知miRNA，370種未知miRNA發(fā)生變化。
　　結(jié)論：
　　通過左心輔助裝置對心梗早期心肌卸負(fù)荷，可以有效減輕心梗心肌細(xì)胞死亡程度，減少炎癥細(xì)胞滲出，能為心梗后續(xù)治療提供良好的心肌細(xì)胞基礎(chǔ)