壓力超負(fù)荷早期大鼠心臟心肌細(xì)胞自噬變化的時程研究.pdf

1、目的：
　　心肌細(xì)胞自噬在維持正常心臟結(jié)構(gòu)和功能中起重要作用。我們和其他前期研究表明，在小鼠壓力超負(fù)荷誘導(dǎo)心肌肥厚和心力衰竭模型上，在心力衰竭期，心肌細(xì)自噬明顯增加，增加的心肌細(xì)胞自噬與心肌細(xì)胞凋亡和心功能降低有關(guān)。然而，在壓力超負(fù)荷誘導(dǎo)心肌肥厚早期，心肌細(xì)胞自噬的變化尚未完全闡明。本研究在腹主動脈縮窄誘導(dǎo)壓力超負(fù)荷大鼠模型上探究心肌細(xì)胞自噬的時程變化及其與心肌肥厚的關(guān)系。
　　方法：
　　1.動物實(shí)驗造模：體重180

2、-200g雄性SD大鼠行腹主動脈縮窄術(shù)（Abdominal aorta constriction，AAC），并設(shè)立假手術(shù)sham組，造模成功后分別于術(shù)后1h，3h，6h，24h，48h，72h處死。
　　2.實(shí)驗分組：
　?。?）AAC組30只，分別于術(shù)后1h，3h，6h，24h，48h，72h不同時間點(diǎn)處死5只；
　　（2）假手術(shù)組（sham)10只，分別于術(shù)后6h，72h各處死5只。
　　3.心肌肥厚和心肌細(xì)

3、胞自噬指標(biāo)測定：心臟重量和體重比率（HW/BW，心臟重量指數(shù)），左心室重量和體重比率（LVW/BW，左心室重量指數(shù)）用于評估心肌肥厚；HE染色觀察心肌細(xì)胞大小的改變；應(yīng)用Western blot技術(shù)檢測心肌組織自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　AAC術(shù)后AAC1h和3h時，與假手術(shù)相比，心臟重量和左心室重量指數(shù)沒有明顯變化，AAC術(shù)后6h，HW/BW比率有輕度增加趨勢。AAC術(shù)后24h時，HW/BW比率，LVW/BW比率

4、有進(jìn)一步增加趨勢，48h和72h時顯著增加。AAC組72h與假手術(shù)sham組相比有統(tǒng)計學(xué)意義。HE染色顯示72h AAC組心肌細(xì)胞直徑較Sham組增大，細(xì)胞排列雜亂；免疫印跡結(jié)果表明，與假手術(shù)組相比，AAC組，心肌細(xì)胞自噬指標(biāo)LC3II/I比率，Beclin1和Atg12蛋白表達(dá)顯著降低。
　　結(jié)論：
　　壓力超負(fù)荷早期大鼠心臟心肌細(xì)胞自噬進(jìn)行性降低，心肌細(xì)胞自噬降低與心肌肥厚有關(guān)。提示在壓力超負(fù)荷誘導(dǎo)心肌肥厚早期，應(yīng)用心肌