多孔鉭修復(fù)兔節(jié)段性骨缺損“鉭-骨”界面成骨的組織形態(tài)學(xué)變化.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)通過(guò)X線、組織形態(tài)學(xué)（石蠟切片、硬組織切片、掃描電鏡）、Micro-CT觀察筋膜包裹的國(guó)產(chǎn)多孔鉭植入骨缺損后“鉭—骨”界面的生物相容性和骨修復(fù)能力，探討筋膜包裹的國(guó)產(chǎn)鉭-骨界面的成骨能力，從而為國(guó)產(chǎn)多孔鉭在骨缺損修復(fù)、關(guān)節(jié)置換及骨性融合的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：1、材料準(zhǔn)備及分組：將多孔鉭材料制成直徑為4mm，長(zhǎng)20mm的圓柱體，選取45只6月齡新西蘭大白兔,隨機(jī)抽取分為3組,筋膜鉭組：多孔鉭+筋膜包裹組18

2、只，鉭組：?jiǎn)渭兌嗫锥嗫足g組18只，空白對(duì)照組：9只。2、手術(shù)步驟及術(shù)后X線：取右側(cè)前臂橈側(cè)中段制作橈骨骨缺損（20 mm），將內(nèi)植物嵌壓植入缺損區(qū)?？瞻捉M不植入內(nèi)植物。術(shù)后4、8、16周投照右上肢正側(cè)位DR片。3、取材及大體觀察：各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分別于術(shù)后4、8、16周處死，取材。行形態(tài)學(xué)觀察、硬組織切片觀察、掃描電鏡、Micro-CT；三個(gè)時(shí)間點(diǎn)空白對(duì)照組各處死3只行形態(tài)學(xué)觀察。觀察術(shù)后4、8、16周三個(gè)時(shí)間點(diǎn)各組骨缺損部位的大體愈合情況

3、，評(píng)估各組術(shù)后16周時(shí)的修復(fù)效果。4、多孔鉭-骨界面組織石蠟切片常規(guī)組織學(xué)染色觀察及毛細(xì)血管計(jì)數(shù)：光學(xué)顯微鏡下觀察植入材料與宿主骨界面新骨生長(zhǎng)情況。觀察材料內(nèi)部新生骨再生情況及空白對(duì)照組骨缺損處情況及毛細(xì)血管。5、硬組織切片觀察：光學(xué)顯微鏡下觀察纖維組織的分布及成骨細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、分布情況。筋膜鉭組及多孔鉭組隨機(jī)選取術(shù)后16周切片6張，采用IPP6.0顯微圖象分析軟件對(duì)骨組織切片進(jìn)行骨組織形態(tài)分析計(jì)量。6、植入物界面掃描電鏡觀察：掃描電

4、鏡觀察鉭—骨界面毛細(xì)血管再生情況、骨組織及纖維組織生長(zhǎng)情況。7 Micro-CT評(píng)估：于術(shù)后8、16周，筋膜鉭組和鉭組各隨機(jī)選取3只標(biāo)本，在一定的條件下對(duì)多孔鉭及周圍骨質(zhì)進(jìn)行 micro-CT掃描，并對(duì)16周標(biāo)本行三維重建并行骨形態(tài)計(jì)量學(xué)分析，觀察并分析各組中的界面及周圍的骨質(zhì)情況。
　　結(jié)果：1、影像學(xué)觀察：于術(shù)后4、8、16周三個(gè)時(shí)間將筋膜鉭組和鉭組實(shí)驗(yàn)兔X線觀察見(jiàn)材料與骨質(zhì)交接界處有不同程度的骨膜反應(yīng)。兩組材料與受體骨界面之

5、間可以觀察到低密度新生骨，沒(méi)有觀察到間隙、透明帶及骨質(zhì)溶解。2、大體觀察：術(shù)后4周筋膜鉭組和鉭組材料表面少量骨樣組織形成，空白對(duì)照組標(biāo)本缺損處清晰；術(shù)后8、16周筋膜鉭組缺損部位逐漸被新生骨組織覆蓋；鉭組缺損部位也逐漸被新生骨組織覆蓋，修復(fù)程度不及筋膜鉭組，空白對(duì)照組標(biāo)本缺損處未能修復(fù)，逐漸被纖維組織填充。3、多孔鉭-骨界面組織石蠟切片常規(guī)組織學(xué)染色觀察及毛細(xì)血管計(jì)數(shù)：術(shù)后筋膜鉭組及多孔鉭組逐漸在鉭-骨界面處形成新生的骨性骨小梁，新生骨

6、組織逐步成熟。空白組骨缺損始終存在，洞壁可見(jiàn)纖維膜。同一時(shí)間點(diǎn)小血管數(shù)量分析顯示：各時(shí)間點(diǎn)筋膜鉭組小血管數(shù)量均顯著高于鉭組（P<0.05)。4、硬組織切片觀察：術(shù)后4、8、16周，筋膜鉭組和鉭組多孔鉭界面新生骨及骨組織逐漸增加，并逐漸出現(xiàn)新生骨小梁并向多孔鉭孔隙內(nèi)生長(zhǎng)，骨組織與多孔鉭接觸趨于緊密，骨缺損區(qū)域逐漸被新生骨樣組織覆蓋，新生骨組織與多孔鉭結(jié)合越發(fā)緊密。術(shù)后16周兩組標(biāo)本經(jīng)過(guò)骨組織計(jì)量學(xué)分析結(jié)果表明：筋膜鉭組及鉭組骨小梁數(shù)目（T

7、b.N）差異在兩組間未發(fā)現(xiàn)不同（P>0.05)。筋膜鉭組骨體積分?jǐn)?shù)（BV/TV）高于鉭組（P<0.05)。筋膜鉭組骨小梁厚度（Tb.Th）高于鉭組(P<0.05)。筋膜鉭組骨小梁分離度（Tb.Sp）低于鉭組（P<0.05)。5掃描電鏡觀察：術(shù)后4、8、16周，筋膜鉭組和鉭組掃描電鏡觀察材料表面鈣鹽沉積及新生骨及成骨細(xì)胞數(shù)量逐漸增多，分泌的胞外基質(zhì)逐漸將鉭覆蓋，孔隙內(nèi)長(zhǎng)入的新生骨組織逐漸增多。6、Micro-CT掃描觀察：術(shù)后8、16周筋

8、膜鉭組多孔鉭與宿主骨之間的骨性連結(jié)逐漸變多，新生骨痂逐漸逐漸向缺損部位延伸，并與多孔鉭形成整合。術(shù)后16周兩組標(biāo)本經(jīng)過(guò)骨組織計(jì)量學(xué)分析結(jié)果表明：筋膜鉭組及鉭組骨小梁數(shù)目（Tb.N）差異在兩組間未發(fā)現(xiàn)不同（P>0.05)。筋膜鉭組骨體積分?jǐn)?shù)（BV/TV）高于鉭組(P<0.05)。筋膜鉭組骨小梁厚度（Tb.Th）高于鉭組（P<0.05)。筋膜鉭組骨小梁分離度（Tb.Sp）低于鉭組(P<0.05)。
　　結(jié)論：1、帶蒂筋膜瓣可加速多孔鉭