HP-PRRSV GD株強(qiáng)弱毒株抗原在感染豬體內(nèi)的動(dòng)態(tài)分布研究.pdf

1、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征(Highly pathogenic porcine reproductive andrespiratory syndrome,HP-PRRS)是由美洲型PRRSV高致病性變異毒株引起的一種急性高致死性疫病,自2006年爆發(fā)以來(lái),給我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)造成了非常嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。近年來(lái),國(guó)內(nèi)新爆發(fā)和流行的高致病性PRRS,主要以高熱、流產(chǎn)、高發(fā)病率和高死亡率為特征,是目前影響我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展最重要的疾病之一。
　　

2、目前,病毒基因亞型及血清型很多,同種但是不同致病力的病毒可以引起宿主靶細(xì)胞產(chǎn)生不同的應(yīng)答反應(yīng)。傳統(tǒng)滅活苗的保護(hù)力往往十分有限,不能達(dá)到預(yù)防HP-PRRSV的效果。而新型弱毒疫苗保護(hù)的毒株和豬場(chǎng)的毒株不一定能形成交叉保護(hù),即使基因型差異很小,這是當(dāng)前防控PRRS的最大難題。因此進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)新型PRRS疫苗并制定出更加合理的防控方案對(duì)我國(guó)養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)意義重大。
　　 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)比較幾株美洲株序列,選取ORF6和ORF7閱讀框內(nèi)保守區(qū)域

3、,設(shè)計(jì)引物和探針,建立RT-PCR.方法和Taqman熒光定量PCR檢測(cè)方法,結(jié)果顯示特異性、敏感性均良好,熒光定量PCR方法比普通PCR方法敏感10-100倍作用。
　　 通過(guò)建立的RT-PCR方法和Taqman熒光定量檢測(cè)方法研究本實(shí)驗(yàn)室培育的弱毒疫苗株GDr180株和強(qiáng)毒GD株F5代在感染40日齡仔豬后抗原在豬組織器官中的分布情況,以比較強(qiáng)弱毒株的組織嗜性差異,從而進(jìn)一步揭示弱毒疫苗株的致病特性變化機(jī)理。結(jié)果顯示強(qiáng)弱毒株在

4、組織和器官中的分布情況差異顯著,分布范圍以及持續(xù)存留時(shí)間也有較大的不同。強(qiáng)毒株在第2周之前抗原分布范圍最廣,第2周之后分布范圍明顯減少；相對(duì)于強(qiáng)毒株而言,弱毒株感染后在組織中出現(xiàn)時(shí)間相對(duì)滯后,帶毒時(shí)間主要集中在第2周至第3周之間,在第5周完全消失。從分布范圍來(lái)看,強(qiáng)毒株的組織嗜性范圍較廣,而弱毒株僅限于肺臟及淋巴結(jié)等組織。說(shuō)明強(qiáng)毒株在細(xì)胞傳代過(guò)程中毒力下降的同時(shí),組織嗜性的范圍也明顯縮小,這可能是病毒與細(xì)胞的長(zhǎng)期相互適應(yīng)有關(guān)。