TGF-β1與TNF-α基因多態(tài)性位點(diǎn)不同基因型矽塵作業(yè)人員體內(nèi)硅元素水平研究.pdf

1、目的：矽肺(Silicosis)是由于長(zhǎng)期吸入含有較高濃度游離二氧化硅的粉塵而引起的以肺組織彌漫纖維化及炎癥反應(yīng)為基本病理改變的一種全身性疾病，是目前我國(guó)最嚴(yán)重的職業(yè)衛(wèi)生問(wèn)題。矽肺發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，也無(wú)理想的治療方法，肺部纖維化一旦發(fā)生便不可逆轉(zhuǎn)。二氧化硅是矽肺發(fā)生的致病因子，并且遺傳因素在矽肺的發(fā)生與發(fā)展過(guò)程中起到了一定的作用。本研究采用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(ICP-MS)測(cè)定接矽塵作業(yè)人員體內(nèi)硅元素水平并與矽肺發(fā)生有關(guān)聯(lián)的轉(zhuǎn)化

2、生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）與腫瘤壞死因子α（TNF-α）基因多態(tài)性相結(jié)合，初步探討不同遺傳背景矽塵作業(yè)人員體內(nèi)硅元素水平的差異，為進(jìn)一步闡明矽肺的發(fā)病機(jī)制提供一定的理論依據(jù)及實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)。
　　方法：1研究對(duì)象選擇：選取河南省平頂山市某鐵礦作業(yè)工人為研究對(duì)象（896例），其中包括未接塵對(duì)照人員56例、矽肺病例112例，其他728例均為接矽塵作業(yè)人員，所有研究對(duì)象均為男性。2研究對(duì)象問(wèn)卷調(diào)查：采用自行設(shè)計(jì)的調(diào)查問(wèn)卷收集所有研究對(duì)象一

3、般資料，包括姓名、年齡、性別、吸煙飲酒情況、既往病史、職業(yè)病診斷史、工作單位、工作車間、工種（爆破工、挖掘工、鉆工等）、接塵工齡、職業(yè)防護(hù)情況等。3生物樣品采集：采集研究對(duì)象空腹肘靜脈血5ml，取2ml加入 EDTA抗凝管用于提取全血基因組 DNA,剩下3ml加入離心管并離心分離血清用于檢測(cè)硅元素水平；用15 ml離心管收集尿液；樣品于-20℃冰箱內(nèi)儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?采用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（ICP-MS）檢測(cè)血清、尿液硅元素水平；采用聚合

4、酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（PCR-RFLP）方法檢測(cè)基因型。5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：采用Excel2003版軟件錄入數(shù)據(jù)建立數(shù)據(jù)庫(kù)，SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：1ICP-MS檢測(cè)樣品中硅元素的加標(biāo)回收率為88.9～110.2％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為0.63～3.24%。2矽塵作業(yè)人員接矽塵后血清、尿液中硅元素水平迅速升高且在5年達(dá)到峰值，隨著接矽塵年限的延長(zhǎng)，血清、尿液中硅

5、元素水平呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢(shì)。3 TGF-β1基因啟動(dòng)子區(qū)域-509C/T位點(diǎn)矽肺病例組CC、CT、TT基因型頻率分別為27.6%、32.2%、40.2%，C、T等位基因頻率分別為43.8%、56.2%，對(duì)照組CC、CT、TT基因型頻率分別為43.8%、33.9%、22.3%， C、T等位基因頻率分別為60.7%、39.3%，病例組與對(duì)照組基因型和等位基因頻率分布的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),且病例組 T等位基因頻率高于對(duì)照組,差

6、異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。TNF-α-308G/A位點(diǎn)矽肺病例組GG、GA、AA基因型頻率分別為27.6%、32.2%、40.2%，G、A等位基因頻率分別為41.9%、58.1%，對(duì)照組GG、GA、AA基因型頻率分別為46.5%、27.6%、25.9%，G、A等位基因頻率分別為60.2%、39.7%，病例組與對(duì)照組基因型和等位基因頻率分布的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),且病例組 GA/AA基因型頻率高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

7、義(P<0.05), A等位基因頻率也高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。4 TGF-β1-509C/T位點(diǎn) TT基因型組接矽塵作業(yè)工人血清、尿液硅元素水平明顯高于 CC/CT基因型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；TNF-α-308G/A位點(diǎn) GA/AA基因型組接矽塵作業(yè)工人血清、尿液硅元素水平明顯高于GG基因型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：1矽塵作業(yè)人員體內(nèi)硅元素水平可能是矽肺早期診斷的合適生