家蠶質(zhì)多角體病毒入侵、復制機理的電子顯微學研究.pdf

1、現(xiàn)有兩種假說：一是病毒僅將其髓核物質(zhì)(即核酸)經(jīng)突起注入到細胞質(zhì)中，而衣殼留在細胞表面；二是病毒粒子通過內(nèi)吞方式進入細胞。以上兩種假說均是建立在用體外培養(yǎng)細胞進行研究的基礎上。為了澄清質(zhì)多角體病毒的入侵方式，本文以家蠶質(zhì)多角體病毒(Bombyxmoricypovirus1，BmCPV-1)為材料，應用電子顯微技術(簡稱電鏡技術)研究了病毒在宿主體內(nèi)的入侵。作者觀察到“BmCPV-1是完整病毒粒子穿膜進入中腸細胞”，這一入侵方式在質(zhì)多角體

2、病毒屬尚屬首次發(fā)現(xiàn)?！　≠|(zhì)多角體病毒目前尚缺少詳盡的復制資料。早期研究認為病毒核酸是在宿主細胞核內(nèi)合成，之后運到細胞質(zhì)去裝配病毒。這一觀點與“呼腸孤病毒的復制是在細胞質(zhì)內(nèi)完成”的論點存在沖突，為了澄清質(zhì)多角體病毒核酸復制的場所，并定位病毒蛋白在細胞內(nèi)的合成位點，本文應用電鏡原位雜交技術和免疫電鏡技術，對BmCPV-1的核酸和蛋白分別進行了追蹤定位研究。用地高辛標記的病毒寡核苷酸序列作為探針，應用原位雜交技術，在超微結構水平上，定位病毒

3、核酸復制中間體——正鏈RNA在細胞內(nèi)的分布位置。結果表明親代病毒進入核后，在核仁上先合成正鏈RNA，之后運到細胞質(zhì)完成后期的核酸復制。此外，作者用BmCPV-1病毒粒子的多克隆抗體對樣品超薄切片進行免疫標記，結果表明病毒蛋白是在病毒發(fā)生基質(zhì)附近的核糖體上合成，運到病毒發(fā)生基質(zhì)內(nèi)貯存，并在這里與病毒單鏈正鏈RNA組裝成病毒粒子前體，在病毒粒子前體中合成雙鏈基因組，病毒粒子前體進一步組裝最后形成成熟病毒粒子?！　”菊撐南到y(tǒng)研究了BmCPV