雙孢蘑菇單孢子雜交及雜交菌株酯酶同工酶研究.pdf

1、為了發(fā)展雙孢蘑菇(Ayaricus bisporus)生產(chǎn),選育優(yōu)良的蘑菇菌種是個(gè)關(guān)鍵的問題之一。在改良蘑菇菌種和選育優(yōu)良新菌種的方法中,以單孢菌株選育和單孢雜交選育為比較重要和值得應(yīng)用的方法,可以使雙孢蘑菇的單產(chǎn)較大幅度的提高。
　　 本文采用了引自加拿大的雙孢蘑菇品種Ta、Tb,以及國(guó)內(nèi)主栽品種As2796,通過對(duì)雙孢蘑菇菌農(nóng)藝學(xué)性狀的測(cè)定,對(duì)國(guó)外引進(jìn)品種、國(guó)內(nèi)主栽品種的生產(chǎn)性能作了評(píng)價(jià)。同時(shí)選用引自加拿大的Tb和國(guó)內(nèi)普遍栽

2、培的As2796雙孢蘑菇為親本菌株進(jìn)行單孢分離研究,找到一種較為簡(jiǎn)單易行、高效、選擇性強(qiáng)的單孢分離法。對(duì)這些單孢菌株的培養(yǎng)性狀和自發(fā)營(yíng)養(yǎng)缺陷型等進(jìn)行研究,利用營(yíng)養(yǎng)缺陷型單孢菌株進(jìn)行雜交,以營(yíng)養(yǎng)缺陷因子互補(bǔ)作為雜合體選擇標(biāo)記。并進(jìn)行酯酶同工酶電泳分析。結(jié)果如下:
　　 (1)通過引進(jìn)品種與國(guó)內(nèi)主要栽培種的農(nóng)藝學(xué)性狀比較,從加拿大引進(jìn)的Tb表現(xiàn)出高產(chǎn)性狀、出菇早、且出菇整齊,子實(shí)體肉質(zhì)細(xì)嫩,口味較好。但在抗逆性和適應(yīng)性方面,國(guó)內(nèi)品種

3、As2796優(yōu)于Tb。
　　 (2)對(duì)傳統(tǒng)的單孢分離方法進(jìn)行了改進(jìn),加入吐溫使分散的孢子在無菌水中分布均勻,簡(jiǎn)單易行,提高了單孢分離的效率。抗生素的加入有效的降低了雜菌的污染。注射器的使用使得整個(gè)稀釋過程完全在一個(gè)密閉無菌的環(huán)境中進(jìn)行,進(jìn)一步降低了染菌率,試驗(yàn)中污染率為5.30％。雙孢蘑菇的單孢子不容易萌發(fā)。雙孢蘑菇單孢子的萌發(fā)不僅取決于其自身的內(nèi)在因素外,還與其外界的培養(yǎng)條件密切相關(guān)。高密度的孢子和同種刺激菌絲體的存在能顯著的

4、提高單孢子的萌發(fā)率,雙孢蘑菇孢子的質(zhì)量對(duì)單孢子萌發(fā)產(chǎn)生很大影響,而添加刺激物對(duì)孢子萌發(fā)影響并不大。
　　 (3)在雙孢蘑菇的單孢培養(yǎng)物中存在著自發(fā)營(yíng)養(yǎng)缺陷突變,試驗(yàn)中從429株Tb單孢菌株中篩選到48株?duì)I養(yǎng)缺陷型菌株,發(fā)生率為11.3％；從127株As2796單孢菌株中篩選到13株?duì)I養(yǎng)缺陷型菌株,發(fā)生率為10.2％。共有61株被鑒定為營(yíng)養(yǎng)缺陷型,平均發(fā)生率10.8％。其中蛋氨酸、腺嘌呤營(yíng)養(yǎng)缺陷型占有很大比重,蛋氨酸占營(yíng)養(yǎng)缺陷菌株

5、的34.4％,腺嘌呤占營(yíng)養(yǎng)缺陷菌株的21.3％,組氨酸占有8.2％,其他的缺陷因子型占有的比例很小。營(yíng)養(yǎng)缺陷菌株雜交試驗(yàn)中,不同品系的菌株之間的雜交率很低,為18.1％。最后鑒定為營(yíng)養(yǎng)缺陷互補(bǔ)的雜交菌株為13株。并觀察其生長(zhǎng)情況,淘汰生長(zhǎng)不好的雜交菌株,保留下長(zhǎng)勢(shì)較好的雜交菌株有編號(hào):AT035011、AT045121、AT061243、AT110355、AT035341、AT078121、AT022352、AT116345、AT056

6、129共9株。
　　 (4)酯酶同工酶分析結(jié)果表明,雜交菌株出現(xiàn)了雙親沒有的新譜帶(Rf=0.40),這條譜帶出現(xiàn)的因?yàn)榭赡芘c雜交種的雜交優(yōu)勢(shì)有關(guān)。酯酶同工酶電泳結(jié)果說明雜交菌株既遺傳了親本的大部分遺傳物質(zhì),同時(shí)也因?yàn)殡s交發(fā)生了一些變異。結(jié)合前面的分析,雜交菌株AT061243、AT035011、AT116345、AT035341可能綜合了雙親各自的優(yōu)良性狀,Tb菌株高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)和As2796菌株適應(yīng)力強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)。但也要看到AT061