不同濃度小柴胡湯對(duì)小鼠B16黑素瘤細(xì)胞TYR、TRP-1、TRP-2mRNA及相關(guān)蛋白表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　研究不同濃度小柴胡湯對(duì)B16黑素瘤細(xì)胞黑素合成相關(guān)酶酪氨酸酶（Tyrosinase，TYR），酪氨酸酶相關(guān)蛋白-1（Tyrosinase related protein1，TRP-1），酪氨酸酶相關(guān)蛋白-2（Tyrosinase related protein2，TRP-2） mRNA及相關(guān)蛋白表達(dá)。
　　方法：
　　采用CCK8檢測(cè)細(xì)胞活力，選取小柴胡湯低、中、高濃度分別為0.1，1，2.5（1mg/ml

2、）用于實(shí)驗(yàn)，RT-PCR法檢測(cè)B16細(xì)胞中TYR，TRP-1，TRP-2 mRNA及相關(guān)蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1、三種不同濃度小柴胡水煎液藥物對(duì)B16黑素瘤細(xì)胞增殖率影響與正常對(duì)照組比較呈現(xiàn)出明顯抑制作用（低濃度組與正常組比較p＜0.05，中濃度組及高濃度組兩組與正常組比較p＜0.01），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各濃度小柴胡水煎液藥物組組間比較隨著濃度的增加抑制作用逐漸增強(qiáng)（p＜0.05），表現(xiàn)出濃度依賴性。
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3、、三種不同濃度小柴胡水煎液藥物對(duì)B16黑素瘤細(xì)胞TYRmRNA及相關(guān)蛋白的表達(dá)與正常對(duì)照組比較均有明顯抑制作用（低濃度組與正常組比較p＜0.05，中濃度組及高濃度組兩組與正常組比較p＜0.01），各濃度小柴胡水煎液藥物組組間比較隨著濃度的增加抑制作用逐漸增強(qiáng)（p＜0.05），表現(xiàn)出濃度依賴性。
　　3、三種不同濃度小柴胡水煎液藥物對(duì)B16黑素瘤細(xì)胞酪氨酸酶相關(guān)蛋白TRP-1、TRP-2的mRNA及其蛋白的表達(dá)與正常對(duì)照組比較均有明

4、顯抑制作用（低濃度組與正常組比較p＜0.05，中濃度組及高濃度組兩組與正常組比較p＜0.01），各濃度小柴胡水煎液藥物組組間比較隨著濃度的增加抑制作用逐漸增強(qiáng)（p＜0.05），表現(xiàn)出濃度依賴性。
　　結(jié)論：
　　小柴胡湯對(duì)黑素合成的抑制作用除了通過直接抑制TYR活性外，還可通過下調(diào)酪氨酸酶家族其他成員TRP-1，TRP-2的基因表達(dá)、蛋白合成三方面實(shí)現(xiàn)其抑制黑素生成的作用，提示小柴胡湯對(duì)黑素生成的抑制可通過對(duì)酶蛋白轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)