載和厚樸酚納米粒的超聲微泡的研究.pdf

1、近年來(lái)，脂質(zhì)超聲微泡（Microbubble，MBs）作為一種藥物或基因載體，逐漸受到廣泛的關(guān)注。脂質(zhì)的外殼為藥物提供了攜載空間，中心包被惰性氣體使微泡更加穩(wěn)定。載藥微泡注入體內(nèi)后，可以通過(guò)血液循環(huán)到達(dá)靶器官，利用超聲圖像可監(jiān)控微泡到達(dá)靶組織的情況，再利用一定強(qiáng)度的超聲，經(jīng)體表定位輻照使微泡在靶組織內(nèi)破裂，從而達(dá)到藥物定位釋放的目的，而微泡破裂產(chǎn)生的一系列效應(yīng)，可增加藥物吸收，提高療效。
　　在本實(shí)驗(yàn)中，我們選用和厚樸酚為模型藥物

2、，將脂質(zhì)微泡作為一種藥物載體，將和厚樸酚納米粒（HKNs）載入微泡，制備了載和厚樸酚納米粒的脂質(zhì)超聲微泡（HKN-MBs），檢測(cè)其特性；運(yùn)用超聲靶向微泡破裂使藥物定位釋放在靶組織，并通過(guò)體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，探討載和厚樸酚納米粒聯(lián)合超聲靶向微泡破裂對(duì)腫瘤的作用及相關(guān)機(jī)理。本研究為腫瘤的靶向治療提供了新的思路。
　　第一部分載和厚樸酚納米粒的超聲微泡體外分析方法的建立
　　建立HK的HPLC含量測(cè)定方法，HK在5.1min左右出峰，

3、峰形較好，磷脂不影響藥物的測(cè)定。在0.2-50.0μg/mL的濃度范圍，A與C具有良好的線性關(guān)系，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為A=40.68C-3.0458，r=0.9999。其方法回收率、日內(nèi)精密度、日間精密度均符合方法學(xué)要求。
　　第二部分載和厚樸酚納米粒的超聲微泡的制備
　　1.通過(guò)去溶劑化法制備納米粒。
　　2.采用機(jī)械振蕩法成功制備載納米粒的脂質(zhì)超聲微泡。
　　3.制備的微泡上浮效果好，輕輕振搖后，微泡混合均勻。

4、r>　　第三部分載和厚樸酚納米粒的超聲微泡制劑學(xué)性質(zhì)的考察
　　1.HKN-MBs與空白MBs相比，HKN-MBs的粒徑較大，可能因?yàn)槠渲邪薍KNs，MBs為圓形的空泡，大小均勻，分散程度較好。
　　2.HKNs的粒徑是（159.3±45.03）nm，空白 MBs的粒徑為（470.5±46.21）nm，HKN-MBs的粒徑是（1447.0±182.4）nm。
　　3.HKN-MBs的包封率為（67.78±1.38）

5、%，載藥量為（3.48±0.20）%。
　　4.利用激光共聚焦顯微鏡觀察HKN-MBs的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，進(jìn)一步證明HKN-MBs是同時(shí)包裹了HKNs和氟碳?xì)怏w。
　　5.體外超聲顯影實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，相對(duì)于生理鹽水組和HKNs組，HKN-MBs組和空白MBs組超聲影像有所增強(qiáng)。
　　第四部分載和厚樸酚納米粒的超聲微泡對(duì)Lewis肺癌腫瘤的抑制作用
　　生理鹽水對(duì)照組的腫瘤重量為(934.9±81.2)mg，HKNs實(shí)驗(yàn)組的

6、腫瘤重量為(655.0±73.4) mg，腫瘤抑制率為29.94%。HKN-MBs實(shí)驗(yàn)組的腫瘤重量為(627.8±64.1) mg，腫瘤抑制率為32.85%。HKN-MB+US實(shí)驗(yàn)組的腫瘤重量為(478.8±41.7) mg，腫瘤抑制率為48.78%，結(jié)果表明HKN-MB+US實(shí)驗(yàn)組具有較強(qiáng)的抑瘤作用。
　　2.生理鹽水對(duì)照組的腫瘤生長(zhǎng)速度最快，而HKNs和HKN-MBs實(shí)驗(yàn)組的腫瘤生長(zhǎng)速度相對(duì)較慢，HKN-MB+US組的腫瘤生長(zhǎng)

7、速度最慢。實(shí)驗(yàn)組的腫瘤體積明顯比對(duì)照組小，其中HKN-MB+US組的腫瘤體積最小，從腫瘤生長(zhǎng)曲線和腫瘤大小可以看出，實(shí)驗(yàn)組HKN-MB+US具有較強(qiáng)的抑瘤作用。
　　3.體內(nèi)超聲顯影實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，相對(duì)于生理鹽水組和HKNs組，HKN-MBs組和空白MBs組超聲影像有所增強(qiáng)。
　　4.病理切片HE染色實(shí)驗(yàn)顯示HKN-MB+US實(shí)驗(yàn)組與其他組相比顯示出具有大范圍的灶性壞死組織，進(jìn)一步證明HKN-MB+US實(shí)驗(yàn)組具有較強(qiáng)的抑瘤作用