潮汕地區(qū)食管鱗癌患者人乳頭瘤病毒感染與CDH1甲基化的研究.pdf

1、背景和目的：食管鱗狀細(xì)胞癌（Esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）在潮汕地區(qū)高發(fā)，其危險因素可能包括人乳頭瘤病毒（Human papillomavirus，HPV）感染。CDH1編碼E-cadherin，研究表明，E-cadherin與多種腫瘤進(jìn)展、轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。在潮汕地區(qū)食管鱗癌患者中，HPV的感染與CDH1異常甲基化之間的關(guān)系目前尚不明確。本課題擬研究潮汕地區(qū)食管鱗癌患者HPV包括亞型HPV

2、16、HPV18的感染情況及其對CDH1異常甲基化、E-cadherin蛋白表達(dá)情況的影響。
　　材料和方法：本課題的入組病例為2013年10月至2014年5月汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬腫瘤醫(yī)院入院的且被病理確診的食管鱗狀細(xì)胞癌患者。共85例食管鱗狀細(xì)胞癌患者的手術(shù)切除標(biāo)本，其中77例腫瘤組織標(biāo)本有相應(yīng)的癌旁正常組織（距腫瘤邊緣5cm以上的正常食管粘膜）。本課題采用巢式PCR的方法檢測了人乳頭瘤病毒HPV及其亞型（HPV16和HPV18）

3、的感染情況。同時，本課題檢測了入組病例的腫瘤組織及對應(yīng)的癌旁正常組織中CDH1基因的甲基化狀態(tài)，檢測方法為甲基化特異性PCR。最后，本課題運用免疫組織化學(xué)染色的方法檢測了入組病例中52例腫瘤組織及對應(yīng)癌旁正常組織中E-cadherin的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：本研究以人乳頭瘤病毒HPV通用引物PGMY09/11，聯(lián)合通用引物GP5+/6+巢式PCR方法檢測出入組病例食管鱗癌患者中有55例存在HPV感染，感染率為64.7％。對感染陽性

4、的患者進(jìn)一步進(jìn)行的HPV亞型（HPV16、HPV18）感染情況的檢測顯示，HPV16亞型的感染患者有25例，HPV18亞型的感染患者有6例，分別占總?cè)藬?shù)的29.41%和7.06%。另外，其中3例患者同時感染了兩種亞型。在對于CDH1基因甲基化的研究結(jié)果顯示，CDH1在食管鱗癌患者腫瘤組織中的甲基化陽性率為44.7%，而在對應(yīng)的癌旁正常食管黏膜中CDH1的甲基化陽性率僅為10.3%,這種差別具有統(tǒng)計學(xué)意義，腫瘤組織的CDH1甲基化陽性率高

5、于其對應(yīng)的癌旁正常組織。HPV16亞型感染陽性患者的甲基化頻率明顯高于HPV16亞型感染陰性患者，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。對于CDH1編碼的E-cadherin蛋白在入組病例腫瘤組織及其對應(yīng)癌旁正常組織中的表達(dá)研究，免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示，CDH1甲基化分組腫瘤組織中E-cadherin陽性表達(dá)率低于CDH1非甲基化分組中腫瘤組織，差別有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)論：潮汕地區(qū)食管鱗狀細(xì)胞癌患者中異常的CDH1甲基化改變與人乳頭瘤病毒HPV