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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:急性白血?。╝cute leukemia,AL)是一類(lèi)常見(jiàn)的造血干細(xì)胞惡性增殖性疾病,目前認(rèn)為自噬調(diào)控失調(diào)與腫瘤發(fā)生密切相關(guān)。自噬是真核細(xì)胞在自噬相關(guān)基因(autophagy related gene,Atg)的調(diào)控下利用溶酶體降解受損細(xì)胞器和大分子物質(zhì)的過(guò)程,在維持細(xì)胞穩(wěn)定方面起重要作用,是細(xì)胞適應(yīng)內(nèi)外環(huán)境所需的一種基本調(diào)節(jié)方式。
采用免疫組織化學(xué)染色法對(duì)兒童急性白血病骨髓細(xì)胞中自噬相關(guān)基因Atg5、Atg7蛋白表達(dá)水
2、平進(jìn)行檢測(cè),探討這兩種因子活性與兒童急性白血病發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系。
方法:
1研究對(duì)象:實(shí)驗(yàn)組隨機(jī)選取自2014年1月至2016年6月河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院兒科住院的初診未治急性白血病患兒50例,其中急性淋巴細(xì)胞白血病組30例,急性髓細(xì)胞白血病組20例,對(duì)照組選取同期與實(shí)驗(yàn)組年齡性別相匹配的非惡性血液?。ò庖咝匝“鍦p少癥、營(yíng)養(yǎng)性貧血)患兒20例。
2標(biāo)本采集和處理:分別抽取實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組新鮮骨髓標(biāo)本2ml
3、,自然凝固后經(jīng)4%多聚甲醛固定,常規(guī)石蠟包埋、切片。
3實(shí)驗(yàn)方法:采用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)兒童急性淋巴細(xì)胞白血病、急性髓細(xì)胞白血病及對(duì)照組骨髓細(xì)胞中Atg5、Atg7蛋白的表達(dá)水平。
4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,Atg5、Atg7蛋白在各組標(biāo)本中表達(dá)強(qiáng)度采用x2檢驗(yàn)或Fisher確切概率法,P<0.05
有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;Atg5、Atg7蛋白的相關(guān)性使用Spearman相關(guān)
4、性分析進(jìn)行檢驗(yàn),P<0.01有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:
1 Atg5蛋白的表達(dá)情況
1.1 Atg5在急性白血病中陽(yáng)性率(82.0%)高于對(duì)照組陽(yáng)性率(40.0%),兩者之間表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=12.0,P<0.05)。
1.2 Atg5在急性淋巴細(xì)胞白血病中陽(yáng)性率為83.3%,在急性髓細(xì)胞白血病中陽(yáng)性率80.0%,分別同對(duì)照組進(jìn)行比較,各組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=12.063,P<0.05)
5、。
1.3 Atg5在急性淋巴細(xì)胞白血病同急性髓細(xì)胞白血病比較,兩者表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=0.090,P>0.0125)。
1.4 Atg5在急性淋巴細(xì)胞白血病同對(duì)照組比較,兩者表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=10.042,P<0.0125)。
1.5 Atg5在急性髓細(xì)胞白血病同對(duì)照組比較,兩者表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=6.667,P<0.0125)。
2 Atg7蛋白的表達(dá)情況
6、2.1 Atg7在急性白血病中陽(yáng)性率54.0%,在對(duì)照組陽(yáng)性率30.0%,兩者表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=3.302,P>0.05)。
2.2 Atg7在急性淋巴細(xì)胞白血病中陽(yáng)性率43.3%,在急性髓細(xì)胞白血病中陽(yáng)性率70.0%,分別同對(duì)照組進(jìn)行比較,各組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=6.7278, P<0.05)。
2.3 Atg7在急性淋巴細(xì)胞白血病同急性髓細(xì)胞白血病比較,兩者間表達(dá)水平無(wú)明顯差異(x2=3.435,P
7、>0.0125)。
2.4 Atg7在急性淋巴細(xì)胞白血病同對(duì)照組比較,兩者間表達(dá)水平無(wú)明顯差異(x2=0.905,P>0.0125)。
2.5 Atg7在急性髓細(xì)胞白血病同對(duì)照組比較,兩者表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=6.400,P<0.0125)。
3利用Spearman秩相關(guān)性檢驗(yàn)比較Atg5及Atg7蛋白表達(dá)是否相關(guān),求得r=0.333,P>0.01,兩者在急性白血病中的表達(dá)無(wú)明顯相關(guān)性。
結(jié)
8、論:
1 Atg5蛋白在急性淋巴細(xì)胞白血病及急性髓細(xì)胞白血病中表達(dá)上調(diào), Atg5可能參與急性白血病的發(fā)生發(fā)展;Atg7蛋白在急性髓細(xì)胞白血病中表達(dá)上調(diào),自噬活性增高,提示Atg7可能與急性髓細(xì)胞白血病的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。
2實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Atg5、Atg7在急性白血病及非惡性血液病中均有表達(dá),但其表達(dá)水平受疾病種類(lèi)、分型的影響。
3 Atg5、Atg7雖然都參與自噬體形成過(guò)程,但是兩者在急性白血病中的表達(dá)無(wú)明顯相
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