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文檔簡介
1、目的:Daxx(death domain associate protein死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白)是一種多功能核蛋白,在細胞凋亡、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、病毒感染等方面發(fā)揮重要作用。E2F1(E2 promoter binding factor-1,E2啟動子結(jié)合因子-1)轉(zhuǎn)錄因子,是E2F家族的重要成員,在調(diào)節(jié)細胞周期進程和調(diào)節(jié)細胞增殖過程中起關(guān)鍵作用,其過度表達能刺激細胞增殖。本實驗通過應(yīng)用免疫組織化學(xué)鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)(strep
2、tavidinperosi-dase,SP)方法檢測急性白血病患兒骨髓細胞中Daxx和E2F1的表達情況,探討二者在白血病發(fā)病中的作用,為兒童白血病的發(fā)生發(fā)展機制提供新的思路,為其早期診斷提供理論依據(jù),也為白血病的早期防治提供新靶點。
方法:
1病例及分組:本研究將2008年6月-2009年6月于我院確診的初診未治急性白血病患兒40例作為觀察組;包括急性淋巴細胞白血病(acutelymphoblastic l
3、eukemia,ALL)組23例、急性髓細胞性白血病(acutemyelocytic leukemia,AML)組17例。ALL組包括L13例、L220例、無L3病例,其中高危7例,標(biāo)危16例;AML組包括M24例、M34例、M44例、M53例、M61例、M71例、無M1病例。另將性別和年齡與觀察組相匹配的20例非惡性血液病患兒作為對照組。
2標(biāo)本采集及處理:分別抽取觀察組和對照組每個患兒骨髓液0.2ml,涂片后4℃丙酮固
4、定30分鐘,-20℃保存?zhèn)溆?之后應(yīng)用免疫組化SP法檢測Daxx和E2F1的表達。
3統(tǒng)計學(xué)分析:應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計學(xué)軟件對所得數(shù)據(jù)進行卡方檢驗(或Fisher確切概率法)及相關(guān)分析;以P<0.05為差異具有顯著性意義
結(jié)果:
1 Daxx的表達情況
1.1 Daxx蛋白在觀察組患兒中的陽性表達率(40%)明顯高于對照組(10%),兩者間的差異具有顯著性(X2=5.71,P<
5、0.05)。
1.2 Daxx蛋白在AML組患兒中的陽性表達率(58.8%)高于ALL組(26.1%),兩者間的差異具有顯著性(X2=4.365,P<0.05)。
1.3 Daxx在ALL-L1組患兒中的陽性表達率(33.3%)與ALL-L2組(25%)相比,兩者間的差異無顯著性(P=1,P>0.05)。
1.4 Daxx在ALL高危組的陽性表達率(57.1%)明顯高于標(biāo)危組(12.5%),兩者
6、間的差異具有顯著性(P=0.045,P<0.05)。Daxx在ALL高危組的陽性表達率與對照組(10%)相比,兩者間的差異具有顯著性(P=0.024,P<0.05);Daxx在ALL標(biāo)危組的陽性表達率與對照組相比,兩者間的差異無顯著性(P=1.0,P>0.05)。
1.5 Daxx在17例AML組各亞型組中的陽性例數(shù)依次為3例、3例、2例、2例、0例、0例。陽性率依次為75%、75%、50%、66.67%、0%、0%。因M
7、6、M7各僅有1例且無陽性表達,故將M2、M3、M4、M5各組間進行卡方檢驗。各組表達水平間差異無顯著性(P>0.05)。
1.6 Daxx陽性組的緩解率(56.3%)低于陰性組(91.7%),兩者間差異具有顯著性意義(P<0.05)。
2 E2F1的表達情況
2.1 E2F1在觀察組患兒中的陽性表達率(57.5%)明顯高于對照組(20%),兩者間的差異具有顯著性(X2=7.576,P<0.05
8、)。
2.2 E2F1在AML組患兒中的陽性表達率(64.7%)與ALL組(52.2%)相比,兩者間的差異無顯著性(X2=0.628,P>0.05)。
2.3 E2F1在ALL-L1組患兒中的陽性表達率(33.3%)與ALL-L2組(55%)相比,兩者間的差異無顯著性(P=0.59,P>0.05)。
2.4 E2F1在ALL高危組的陽性表達率(71.4%)與標(biāo)危組(56.3%)相比,兩者間的差異
9、無顯著性(P=0.657,P>0.05)。E2F1在ALL高危組的陽性表達率與對照組(20%)相比,兩者間的差異具有顯著性(P=0.023,P<0.05)。E2F1在ALL標(biāo)危組的陽性表達率與對照組相比,兩者間的差異具有顯著性(X2=5.063,P<0.05)。
2.5 E2F1在17例AML組在各亞型組中的陽性例數(shù)依次為3例、3例、3例、2例、0例、0例。陽性率依次為75%、75%、75%、66.67%、0%、0%。因M
10、6、M7各僅有1例且無陽性表達,故將M2、M3、M4、M5各組間進行卡方檢驗。各組表達水平間差異無顯著性(P>0.05)。
2.6 E2F1陽性組的緩解率(69.6%)低于陰性組(88.2%),兩者間差異無顯著性(P>0.05)。
3.在觀察組患兒中,Daxx與E2F1的表達水平進行相關(guān)分析:X2=14.339,P<0.05,說明二者呈正相關(guān)關(guān)系。
結(jié)論:
1 Daxx和E2F1在
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