基于NF-κB-COX-2-PGE2信號(hào)通路探討氧化槐定堿對慢性炎性疼痛的鎮(zhèn)痛作用.pdf

1、目的：觀察氧化槐定堿（oxysophoridine，OSR）對完全弗氏佐劑引起的小鼠慢性炎性疼痛的鎮(zhèn)痛作用，并探討NF-κB/COX-2/PGE2信號(hào)通路對其鎮(zhèn)痛作用的影響。
　　方法：1.行為藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法采用機(jī)械刺痛法和足趾容積測量儀分別測定完全弗氏佐劑致慢性炎性疼痛小鼠損傷足的機(jī)械縮足反射閾值和足腫脹度，觀察OSR對小鼠慢性炎性疼痛鎮(zhèn)痛作用的影響。
　　2.采用qPCR方法檢測OSR對脊髓背角IκBα、p65NF-κB

2、和COX-2mRNA表達(dá)的影響。
　　3.采用Western blot方法檢測OSR對脊髓背角IKKβ、p-IKKβ、IκBα、p-IκBα、p65NF-κB、p-p65NF-κB和COX-2蛋白表達(dá)的影響。
　　4.采用ELISA方法檢測OSR對脊髓背角PGE2蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：1.行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與正常組比較，模型組小鼠機(jī)械縮足反射閾值在實(shí)驗(yàn)的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)都顯著性降低（P<0.01）,模型組小鼠足腫脹度

3、在實(shí)驗(yàn)的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)都明顯增加（P<0.01）；與模型組比較，OSR（160、80、40mg/kg）在CFA給予后1、3、5、7、12d都能增加機(jī)械縮足反射閾值（P<0.05）和降低足腫脹度（P<0.05）。
　　2.qPCR結(jié)果顯示，與模型組比較，OSR(160mg/kg)不影響脊髓背角中p65NF-κB mRNA的表達(dá)，但能顯著提高IκBαmRNA的表達(dá)（P<0.01）和降低COX-2mRNA的表達(dá)(P<0.05)。
　　

4、3.Western blot結(jié)果顯示，與模型組比較，OSR(160mg/kg)能顯著性抑制p-IKKβ（P<0.01）、p-IκBα(P<0.05)、p-p65NF-κB（P<0.01）和COX-2(P<0.01)的蛋白表達(dá)，同時(shí)顯著提高IκBα(P<0.01)的蛋白表達(dá)，但對IKKβ和p65NF-κB的蛋白表達(dá)無影響。
　　4.ELISA結(jié)果顯示，與模型組比較，OSR(160mg/kg)能顯著性抑制PGE2的蛋白表達(dá)(P<0.0