基于NF-κB信號(hào)通路探索石蒜堿抗前列腺癌機(jī)理.pdf

1、NF-κB信號(hào)通路是目前已知的研究較為透徹的細(xì)胞信號(hào)通路之一，幾乎參與了腫瘤發(fā)生的所有生理過(guò)程，包含細(xì)胞增殖、凋亡、血管生成等。目前NF-κB信號(hào)通路已經(jīng)成為多種惡性腫瘤的治療和靶點(diǎn)藥物研發(fā)的熱點(diǎn)。石蒜堿是石蒜屬植物中提取的天然堿性化合物，具有催吐、抗瘧疾、抗炎癥和抗腫瘤等多種生物活性。近年來(lái)有研究表明石蒜堿能夠抑制多種腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，但其作用機(jī)理尚不明確。
　　本研究以NF-κB信號(hào)通路為靶點(diǎn)，通過(guò)體內(nèi)和體外實(shí)

2、驗(yàn)探討石蒜堿的抗前列腺癌活性及其作用機(jī)理。首先采用穩(wěn)定表達(dá)NF-κB調(diào)控?zé)晒馑孛笀?bào)告基因的前列腺癌細(xì)胞PC3評(píng)價(jià)石蒜堿對(duì)NF-κB信號(hào)通路的影響，結(jié)果表明石蒜堿能夠顯著抑制組成性激活或TNF-α誘導(dǎo)的NF-κB信號(hào)通路活性；蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)說(shuō)明石蒜堿對(duì)NF-κB信號(hào)通路關(guān)鍵蛋白p-P65、p-IκBα具有抑制作用；核質(zhì)分離和免疫熒光實(shí)驗(yàn)說(shuō)明石蒜堿抑制了TNF-α誘導(dǎo)的p65的核轉(zhuǎn)位；通過(guò)在HEK293T細(xì)胞中過(guò)表達(dá)IKKβ結(jié)構(gòu)域誘導(dǎo)IK

3、K/NF-κB信號(hào)通路活化，而石蒜堿可以抑制其活性；流式細(xì)胞術(shù)和蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，石蒜堿抑制細(xì)胞周期相關(guān)蛋白cyclinD1和p21的表達(dá)，將細(xì)胞周期阻滯在G2/M期，并且抑制c-myc的表達(dá)，促進(jìn)PARP的裂解，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。為進(jìn)一步驗(yàn)證石蒜堿的抗腫瘤活性，構(gòu)建C57/BL荷瘤小鼠模型；分析腫瘤重量和小鼠體重的變化得知：相較于荷瘤組，5 mg/kg/day給藥組表現(xiàn)出顯著的腫瘤生長(zhǎng)抑制效應(yīng)，其抑瘤率為47.8％；小鼠瘤塊組織的