比較正常前列腺、前列腺增生及前列腺癌組織中核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB經(jīng)典通路及選擇性通路.pdf

1、研究背景：
　　核因子ΚB蛋白家族通過經(jīng)典通路和旁通路發(fā)揮各種作用，而目前這兩種通路在前列腺癌中的作用尚不明確。
　　目的：
　　我們?yōu)榱颂剿鞒鲞@兩種通路在前列腺癌中的作用，分析比較了前列腺正常組織（癌旁組織）、前列腺增生組織(BPH)、前列腺癌組織（PCa）中的核因子ΚB經(jīng)典通路和旁通路。
　　方法：
　　首先，本文利用Oncomine平臺下載了5組前列腺癌數(shù)據(jù)集，同時利用Biocarta，我們列出了NF

2、-kB信號通路的主要成員。對NF-kB信號通路的基因和下載的數(shù)據(jù)進(jìn)行聚類分析。實時定量PCR方法測量PC3、DU145、LNCap、RWPE-1細(xì)胞NF-κB1和NF-κB2的基因表達(dá)水平；構(gòu)建炎癥模型，大鼠隨機(jī)分為大腸桿菌組(n=6)和對照組(n=6)，，免疫組化的方法分析磷酸化P50（P-P50）和磷酸化P52（P-P52）蛋白的表達(dá)情況。前列腺組織分成3組：A組：PCa(n=68);B組：BPH（n=60）;C組：正常前列腺組織（

3、n=15）。用實時定量PCR方法測量NF-κB1和NF-κB2的基因表達(dá)水平。用免疫組化染色的方法分析磷酸化P50（P-P50）和磷酸化P52（P-P52）蛋白的表達(dá)情況。最后結(jié)合患者臨床病理特征分析兩條通路和前列腺癌級別、分期及預(yù)后的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　實時定量PCR方法測量發(fā)現(xiàn)NFKB1在DU145、LNCaP表達(dá)水平低于正常細(xì)胞（倍數(shù)變化分別為2.96倍及3.74倍，P<0.05），PC3的表達(dá)同正常細(xì)胞無顯著差異

4、（P>0.05）；然而，NFKB2在DU145、LNCaP表達(dá)水平高于正常細(xì)胞（倍數(shù)變化分別為11.86倍及14.78倍，P<0.01），而 NFKB2在 PC3的表達(dá)同正常細(xì)胞無顯著差異（P>0.05）；炎癥模型顯示經(jīng)典通路的P50激活，染色主要定位于細(xì)胞漿；與前列腺增生組織、正常前列腺組織相比，前列腺癌組織中的NF-κB1基因差異性地下調(diào)超過1.5倍，而NF-κB2基因差異性上調(diào)超過2倍；A組患者P-P50陽性的比例為26.5％，比

5、B組（88.3%，p=0.005）和C組（100%，p=0.002）顯著性降低，A組患者P-P52陽性的比例為42.6%，比B組（11.7%，p=0.009）和C組（6.7%，p=0.008）顯著性升高；比較A組中P52、P50免疫組化陽性和陰性患者的術(shù)后總體生存率，結(jié)果顯示p-P52陽性和陰性患者術(shù)后總體生存率具有統(tǒng)計學(xué)意義的顯著性差異，而p-P50則無統(tǒng)計學(xué)差異。p-P52陽性患者的預(yù)后更差（p=0.019），。
　　結(jié)論：<