Spata46在小鼠生精過程中的表達(dá)特征及其功能研究.pdf

1、精子發(fā)生是一個(gè)高度復(fù)雜的過程，包括有絲分裂、減數(shù)分裂和精子生成三個(gè)部分。精子生成是產(chǎn)生精子獨(dú)有的特異性形狀的重要步驟，它包括頂體形成、染色體濃縮、核塑形和鞭毛形成，最終產(chǎn)生高度特異的精子。精子的發(fā)育分化缺陷就能導(dǎo)致各種畸形精子癥（如巨頭精子癥和圓頭精子癥）。精子的功能即結(jié)合卵細(xì)胞并將遺傳物質(zhì)傳遞給下一代，而畸形精子癥通常與臨床男性不育密切相關(guān)。
　　基于本實(shí)驗(yàn)室前期的工作基礎(chǔ)，通過睪丸組織基因表達(dá)芯片經(jīng)行分析，篩選出一系列睪丸上調(diào)

2、基因和睪丸下調(diào)基因，這些基因可能與精子發(fā)生及授精密切相關(guān)。根據(jù)人類基因組命名委員會(huì)的命名原則，我們將其中的一個(gè)基因命名為Spata46（spermatogenesis associated46）并進(jìn)行深入探討。利用RT-PCR、RT-qPCR技術(shù)，我們發(fā)現(xiàn)Spata46基因在小鼠和人中均呈睪丸特異性表達(dá)，并在小鼠睪丸中呈年齡依賴性。通過免疫熒光技術(shù)，發(fā)現(xiàn)SPATA46特異定位于長(zhǎng)形精子和成熟精子的頭部，而細(xì)胞實(shí)驗(yàn)證明SPATA46為核膜

3、蛋白。上述結(jié)果表明，SPATA46定位于精子頂體帽區(qū)域的核膜上。
　　通過基因敲出小鼠模型，我們發(fā)現(xiàn) Spata46-/-雄性小鼠生育力下降，并且表現(xiàn)為畸形精子癥。進(jìn)一步通過睪丸組織的透射電鏡，我們發(fā)現(xiàn) Spata46-/-精細(xì)胞的核膜斷裂。最后通過體外授精實(shí)驗(yàn)，我們發(fā)現(xiàn) Spata46-/-精子聚集于卵周隙，并且入卵精子數(shù)明顯下降，說明SPATA46參與調(diào)控精卵融合。
　　綜上所述，SPATA46是一個(gè)新的膜蛋白，特異表達(dá)