NSSR1在小鼠精子發(fā)生和發(fā)育成熟過程中的表達調(diào)控及功能.pdf

1、復旦大學碩士學位論文NSSR1在小鼠精子發(fā)生和發(fā)育成熟過程中的表達調(diào)控及功能姓名：肖平杰申請學位級別：碩士專業(yè)：生理學及生物物理學指導教師：徐平20070510復旦大學碩士學位論文NSSRl在小鼠精子發(fā)生及發(fā)育成熟過程中的表達調(diào)控及功能中文摘要NSSRl在小鼠精子發(fā)生和發(fā)育成熟過程中的表達調(diào)控及功能中文摘要本論文的主要研究方向是探索雄性配子發(fā)生及發(fā)育成熟過程中，前體mRNA剪接調(diào)控因子NSSRl的表達調(diào)節(jié)及相關功能。為此，我們首先詳細研

2、究分析了NSSRl在生殖系統(tǒng)包括睪丸、附睪、子宮等組織中的表達分布及其調(diào)控。由結果可知：1)NSSRl是—個受發(fā)育過程調(diào)控的蛋白，其明顯調(diào)控的時間段主要發(fā)生在性腺分化和性成熟過程中；2)NSSRl在睪丸中主要表達于各類生精細胞中，而在其它類型的細胞如支持細胞中幾乎檢測不到免疫信號，提示了NSSRl可能直接參與生精過程的調(diào)控；3)NSSRl在附睪中呈現(xiàn)高表達，并且同時有磷酸化和非磷酸兩種狀態(tài)的蛋白；4)NSSRl也表達于小鼠子宮內(nèi)膜上皮細

3、胞以及卵細胞的細胞質(zhì)中，提示NsSRl可能與精子在雌性生殖系統(tǒng)中的最后成熟過程相關。NSSRl在睪丸組織中的特異性表達提示了NSSRl可能參與了生精過程的調(diào)控，為了探索這一可能性，我們建立了小鼠隱睪癥模型，在這一模型中，由于睪丸持續(xù)位于比陰囊溫度高出57度的腹腔中，生精過程遭到嚴重破壞，生精過程停止在減數(shù)分裂期，這一模型為我們研究NSSRl在生精過程中的可能功能提供了重要手段。睪丸組織學分析發(fā)現(xiàn)隱睪側(cè)睪丸的質(zhì)量降低到了正常睪丸的50％左

4、右，而且減數(shù)分裂期的各類生精細胞大為減少，個別類型甚至消失了，這些觀察結果證明了我們成功建立了隱睪癥模型。Westcmblot的結果表明在隱睪側(cè)睪丸中的非磷酸化NSSRl蛋白明顯上調(diào)，與此同時SCF、PKC_強、CREM、CREB等基因的選擇性剪接模式發(fā)生了改變。結合過量表達和siRNA干擾等手段，在睪丸來源的生精細胞株GClspg中，我們證明了NSSRl能夠調(diào)控CREB基因5號外顯子的剪接，這一調(diào)控模式和CREB基因在隱睪癥睪丸中的剪