紅褐色烏蘇里貉Agouti基因與KITLG基因的克隆及表達水平研究.pdf

1、為了探討紅褐色烏蘇里貉和野生型烏蘇里貉Agouti基因和KITLG基因的CDS序列以及其在兩種毛色貉中的表達水平，本研究以青島萊西萬盛農(nóng)業(yè)有限公司的野生型烏蘇里貉和紅褐色烏蘇里貉為研究對象，利用克隆測序技術(shù)，成功克隆了兩種毛色貉Agouti基因和KITLG基因的CDS序列，并對所得序列進行了比對分析及與其他物種的同源性比較。利用實時熒光定量PCR技術(shù)對Agouti基因和KITLG基因和在紅褐色烏蘇里貉與野生型烏蘇里貉中的mRNA表達水平

2、差異進行了探究。通過上述研究以期為Agout基因和KITLG基因的功能分析及紅褐色烏蘇里貉毛色突變分子遺傳機制的研究提供一定的理論基礎。
　　試驗成功克隆了野生型烏蘇里貉和紅褐色烏蘇里貉 Agouti基因全長為396 bp的CDS序列和KITLG基因全長為825 bp CDS序列，并發(fā)現(xiàn)兩種貉KITLG基因741 bp的轉(zhuǎn)錄本。利用 DNAMAN軟件進行比對分析，結(jié)果顯示一只紅褐色烏蘇里貉 Agouti基因編碼序列的在130 bp

3、堿基由G突變?yōu)門，而兩種毛色貉KITLG基因序列完全匹配。將兩種基因的CDS序列與其他物種進行同源性比較分析，發(fā)現(xiàn)紅褐色烏蘇里貉Agouti基因與狗、貓、豬、小鼠、黑猩猩、牛、綿羊、馬、虎鯨以及人等物種的同源性均在80.60％以上，KITLG基因與上述物種的同源性均在80.85%以上，兩者均具有高度的保守性。對熒光定量數(shù)據(jù)結(jié)果進行分析，利用SPSS軟件進行獨立樣本T檢驗，結(jié)果表明Agouti基因與KITLG基因在兩種毛色的貉皮膚組織中均