荷葉生物堿類物質(zhì)降脂減肥活性研究.pdf

1、目前，關(guān)于荷葉生物堿類物質(zhì)具有降脂減肥生理功能的研究報(bào)道很多，主要集中在荷葉總生物堿粗提物方面，而且功能評(píng)價(jià)體系大多單一從體內(nèi)試驗(yàn)或體外試驗(yàn)方面開展，采用的試驗(yàn)?zāi)Ｐ椭皇沁x擇具有相關(guān)某種疾病缺陷動(dòng)物模型，或者只是選擇脂肪酶或脂肪細(xì)胞，但是對(duì)荷葉生物堿單體降脂減肥體內(nèi)體外綜合作用效果及其相關(guān)機(jī)制的研究甚少。
　　 本文擬采用課題組前期研究獲得的荷葉總生物堿提取、分離和純化方法，得到荷葉總生物堿，采用高速逆流色譜和制備型液相色譜分離純

2、化得到荷葉生物堿單體物質(zhì)，進(jìn)一步分別從體內(nèi)、體外試驗(yàn)探究荷葉總生物堿及其單體物質(zhì)的降脂減肥效果，以期為荷葉開發(fā)降脂減肥食品或保健品提供理論支持。
　　 本論文的主要研究成果包括以下幾個(gè)方面：
　　 (1)荷葉總生物堿以及四種荷葉生物堿單體的制備和含量測(cè)定。荷葉粉末用75％酸性乙醇(pH為5.0)溶液超聲提取(超聲功率400W，溫度60℃，，時(shí)間60min)后，經(jīng)4%氨水(pH為10.0)沉淀后，濾液經(jīng)氯仿萃取，萃取液用0

3、.45μm濾膜精制純化后旋干，得到荷葉總生物堿提取物，其中荷葉總生物堿含量為72.3%左右。參照課題組前期研究獲得的圖譜資料以及分離條件，荷葉總生物堿提取物再進(jìn)一步通過(guò)高速逆流色譜、制備型HPLC色譜分離后，確定得到了4種荷葉生物堿單體，純度均在90%以上。
　　 (2)建立高脂血癥大鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，給予高脂血癥大鼠模型組不同劑量荷葉總生物堿，陽(yáng)性藥物組降脂藥物辛伐他汀，通過(guò)觀察荷葉總生物堿對(duì)高脂血癥大鼠體質(zhì)量、體脂以及血清脂質(zhì)相關(guān)

4、指標(biāo)的影響來(lái)評(píng)價(jià)其降脂減肥作用。結(jié)果顯示：荷葉總生物堿具有較明顯的降脂減肥作用。高脂血癥大鼠給藥40天后，反映機(jī)體肥胖程度的增長(zhǎng)指標(biāo)如Lee's指數(shù)、體脂及血脂水平都有不同程度地下降。隨著荷葉總生物堿劑量的增多，大鼠的體質(zhì)量、各內(nèi)臟質(zhì)量、Lee's指數(shù)、體脂系數(shù)下降越明顯，高劑量組的降低效果最接近于藥物組。中劑量組的大鼠血清TC、TG、LDL，AI、ALT和AST水平都有顯著降低，效果也接近于藥物組，中劑量荷葉總生物堿對(duì)HDL有顯著的升

5、高趨勢(shì)，其效果比藥物組突出。因此，我們可以確信，荷葉總生物堿具有控制體重，預(yù)防肥胖，調(diào)節(jié)脂代謝紊亂的功效。
　　 (3)對(duì)硝基苯酚法檢測(cè)荷葉總生物堿及四種荷葉生物堿單體對(duì)胰脂酶活性的影響，并考察溫度、pH、抑制劑質(zhì)量濃度對(duì)胰脂酶抑制效果的影響，分析荷葉總生物堿對(duì)胰脂酶的抑制類型。結(jié)果顯示：四種荷葉生物堿單體對(duì)胰脂酶活性的抑制效果是荷葉堿和N-去甲基荷葉堿相仿，O-去甲基荷葉堿和巴婆堿的效果相仿，并且O-去甲基荷葉堿的抑制效果略好

6、于巴婆堿，且四種單體的抑制效果都呈現(xiàn)出劑量效應(yīng)。四種單體對(duì)胰脂酶活性的抑制作用在反應(yīng)體系的溫度上表現(xiàn)一致，反應(yīng)體系的溫度在37℃時(shí)，不同的抑制劑對(duì)胰脂酶活性的抑制作用都最大，低于或高于37℃，抑制率都下降，呈現(xiàn)典型的倒V形或倒U形曲線，但是四種單體對(duì)胰脂酶活性的抑制作用在體系的pH上表現(xiàn)出差異，荷葉總生物堿、荷葉堿、N-去甲基荷葉堿在pH7.4時(shí)對(duì)胰脂酶活性的抑制效果比較好，O-去甲基荷葉堿和巴婆堿在pH7.2時(shí)對(duì)胰脂酶活性的抑制效果比