Sd介導(dǎo)Hippo通路靶基因表達(dá)機(jī)制的探討.pdf

1、Hippo通路最早是在果蠅中發(fā)現(xiàn)的，近幾年的研究發(fā)現(xiàn)，Hippo信號(hào)通路通過同時(shí)調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖與凋亡來控制器官的大小。Hpo通路是一個(gè)激酶級(jí)聯(lián)途徑，Ste20樣激酶Hpo在含有WW結(jié)構(gòu)域的銜接蛋白Sav的幫助下磷酸化并激活NDR家族激酶蛋白Wts。Wts再借助Mob家族蛋白Mats磷酸化下游的Yki抑制其活性來抑制靶基因的轉(zhuǎn)錄，在哺乳動(dòng)物中該條信號(hào)途徑的紊亂會(huì)導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。Scalloped是含有DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，是TE

2、AD/TEF家族蛋白在果蠅中的唯一成員。diapl上游調(diào)控區(qū)域含有最短的Hippo通路應(yīng)答元件，Sd與該元件特異性結(jié)合，介導(dǎo)Hippo信號(hào)通路靶基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控。Sd對(duì)于Yki誘導(dǎo)的組織過度生長(zhǎng)和靶基因表達(dá)是必需的，并且Sd的活性與其在哺乳動(dòng)物中的同源物是保守的。研究表明，Sd作為DNA結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子與Yki相互作用形成轉(zhuǎn)錄復(fù)合物調(diào)節(jié)Hpo靶基因的表達(dá)。目前的研究普遍認(rèn)為Sd協(xié)同Yki促進(jìn)Hpopathway靶基因的轉(zhuǎn)錄，但并不清楚Sd自身

3、對(duì)靶基因的轉(zhuǎn)錄是否也起促進(jìn)作用，此外，Sd介導(dǎo)Hippo通路靶基因表達(dá)的具體機(jī)制也不甚了解，本課題主要對(duì)此進(jìn)行研究。初期工作的結(jié)果表明Sd自身是起抑制作用的，考慮到Sd協(xié)同Yki起促進(jìn)作用，猜測(cè)Sd可能是通過自身形成二聚體起抑制作用，也可是能通過與其他蛋白結(jié)合起抑制作用，對(duì)此進(jìn)一步進(jìn)行研究。通過Co-IP，Western Blot等一系列實(shí)驗(yàn)得出Sd自身并不形成二聚體，在其他因子如最短的Sd結(jié)合序列HRE存在的條件下也不形成二聚體。又采