王不留行對奶牛乳腺上皮細(xì)胞泌乳信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響.pdf

1、我國奶牛業(yè)普遍存在產(chǎn)乳量低、奶牛發(fā)病率高、乳脂和乳蛋白含量相對不高等問題，是制約我國奶牛養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的主要因素。因而如何安全高效地提高牛奶質(zhì)量已成為奶牛養(yǎng)殖業(yè)的首要問題。中藥等天然活性物質(zhì)對奶牛乳腺泌乳信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)控機(jī)理的研究，可以為提高奶牛乳產(chǎn)量、提高奶牛乳品質(zhì)提供重要的理論依據(jù)和實(shí)踐指導(dǎo)，具有極其重要的理論研究及應(yīng)用價值。
　　 長久以來，已經(jīng)證實(shí)中草藥王不留行（Vaccaria segetalis）對雌性動物具有通乳、泌乳的特

2、性，迄今已從王不留行中分離出多種生物活性成分，如環(huán)肽、黃酮苷、三萜皂苷、脂肪酸、類脂和單糖等，為王不留行的生物學(xué)機(jī)理研究提供了重要信息，但其如何調(diào)控奶牛乳腺上皮細(xì)胞（dairy cow mammary gland epithelial cells，DCMECs）泌乳相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路從而促進(jìn)泌乳的機(jī)理尚不清楚。本項(xiàng)目旨在通過體外DCMECs泌乳模型研究王不留行對DCMECs泌乳相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響，從而為其作為催乳中藥在畜牧業(yè)中的使用提

3、供真實(shí)的科學(xué)依據(jù)，并為開發(fā)利用王不留行豐富的天然資源提供一定的理論依據(jù)。
　　 研究分兩部分進(jìn)行。第一部分為:通過水浸提方法制備王不留行提取液，進(jìn)而分別用王不留行水浸提液、雌激素(estrogen，E)以及催乳素(prolactin，PRL)處理體外培養(yǎng)的DCMECs，通過CASY法測定DCMECs的活力以及增殖能力;采用Western blotting方法分別檢測DCMECs中泌乳相關(guān)信號分子的表達(dá)變化;第二部分為:對王不留行

4、、E以及PRL組分別添加蛋氨酸(methionine)、乙酸鈉(sodium acetate)，通過CASY法測定DCMECs的活力以及增殖能力;采用Western blotting方法檢測泌乳相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響。試驗(yàn)結(jié)果顯示:
　　 1)王不留行可以顯著提高DCMECs的活力以及增殖能力，王不留行組MAPK以及cyclinD1的表達(dá)明顯高于對照組(P＜0.05);
　　 2)王不留行可以調(diào)控E和PRL信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。

5、S6K1、AKT1、p-mTOR、p-STAT5、p100、GARS、催乳素受體(prolactin receptor，PRLR)以及雌激素受體(estrogen receptorα，ERα)的表達(dá)水平相較于對照組明顯上調(diào)(P＜0.05);
　　 3)王不留行對乳脂合成相關(guān)信號分子的影響不顯著。PPARγ的表達(dá)水平和對照組沒有明顯差異（P＞0.05）;
　　 4)蛋氨酸可以顯著提高DCMECs的活力以及增殖能力(P＜0.