基于內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)的柴郁溫膽湯抗抑郁癥作用機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　1.觀察柴郁溫膽湯抗抑郁大鼠模型的藥理效應(yīng);
　　2.從內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)探討柴郁溫膽湯抗抑郁的作用機(jī)制。
　　方法:
　　實(shí)驗(yàn)分兩部分進(jìn)行。
　　1.柴郁溫膽湯抗抑郁大鼠模型的藥理學(xué)實(shí)驗(yàn):實(shí)驗(yàn)采用慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激21天復(fù)制大鼠抑郁模型。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為正常組、模型組、柴郁溫膽湯組及氟西汀組，給藥21天。觀察大鼠體重變化，根據(jù)曠場實(shí)驗(yàn)和糖水消耗實(shí)驗(yàn)觀察抑郁模型大鼠的行為學(xué)變化;采用Elisa法檢

2、測大鼠血清中5-HT、DA、ACTH、CORT的含量;采用酶法檢測血清中TG、T-CHO、HDL-C、LDL-C的含量及血清ALT、AST的活性。
　　2.基于內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)探討柴郁溫膽湯抗抑郁的作用機(jī)制研究:采用LC-MS/MS方法檢測大鼠海馬中內(nèi)源性大麻素AEA、2-AG、PEA、OEA的含量;采用Western blot方法檢測大鼠海馬、前額葉皮質(zhì)、脂肪中內(nèi)源性大麻素受體CB1、CB2含量;采用Real-time PCR檢

3、測大鼠海馬、前額葉皮質(zhì)、脂肪中大麻素水解酶FAAH、MAGL表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　1.柴郁溫膽湯抗抑郁大鼠模型的藥理學(xué)實(shí)驗(yàn):①與正常組相比，模型組大鼠體重、糖水消耗量、曠場水平行駛總路程、大便數(shù)量、脂肪含量及血清5-HT、DA明顯或顯著減少，休息時(shí)間、休息次數(shù)及血清ACTH、CORT、TG、T-CHO含量顯著增加。而血清HDL-C含量雖有降低、LDL-C含量雖有升高，但統(tǒng)計(jì)學(xué)無差異;②與模型組相比，柴郁溫膽湯組大鼠糖水

4、消耗量、曠場水平行駛總路程、大便數(shù)量、脂肪含量及血清5-HT、DA含量明顯或顯著增加，休息時(shí)間、休息次數(shù)及血清ACTH、CORT、TG、T-CHO、LDL-C含量明顯或顯著減少。而體重間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，血清HDL-C含量雖有升高，但統(tǒng)計(jì)學(xué)也無差異;③與氟西汀組相比，正常組、模型組、柴郁溫膽湯組大鼠血清ALT、AST的活性均明顯或顯著降低。
　　2.基于內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)探討柴郁溫膽湯抗抑郁的作用機(jī)制研究:①與正常組相比，模型組大鼠海馬

5、中大麻素AEA、2-AG、PEA、OEA的含量顯著降低;模型組大鼠海馬及前額葉皮質(zhì)中大麻素受體CB1的含量顯著降低，受體CB2的含量顯著升高，脂肪中大麻素受體CB1、CB2的含量無明顯差異;大鼠海馬、前額葉皮質(zhì)中大麻素水解酶FAAH、MAGL表達(dá)水平顯著升高，脂肪中MAGL水解酶表達(dá)水平顯著升高，而FAAH水解酶表達(dá)水平雖有升高，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;②與模型組相比，柴郁溫膽湯組大鼠海馬中大麻素AEA、2-AG、PEA、OEA的含量顯著升高;

6、海馬及前額葉皮質(zhì)中大麻素受體CB1的含量顯著升高，受體CB2的含量顯著或明顯降低，脂肪中大麻素受體CB1、CB2的含量無明顯差異;大鼠海馬、前額葉皮質(zhì)中大麻素水解酶FAAH、MAGL表達(dá)水平顯著降低，脂肪中MAGL水解酶表達(dá)水平顯著降低，而FAAH水解酶表達(dá)水平雖有降低，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)論:
　　1.采用慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激的方法可以導(dǎo)致大鼠抑郁樣行為學(xué)改變，而中藥復(fù)方柴郁溫膽湯具有改善抑郁行為的作用。
　　

7、2.柴郁溫膽湯具有升高抑郁模型大鼠血清5-HT、DA含量，降低ACTH、CORT含量的作用。
　　3.柴郁溫膽湯具有降低抑郁模型大鼠血清TG、T-CHO、LDL-C含量的作用。
　　4.氟西汀具有升高大鼠血清ALT、AST的活性作用，提示氟西汀可能產(chǎn)生炎癥損傷的不良反應(yīng)。
　　5.柴郁溫膽湯具有提高大鼠海馬中大麻素AEA、2-AG、PEA、OEA的含量;升高大鼠海馬、前額葉皮質(zhì)中大麻素受體CB1、降低CB2的含量;降低