番石榴葉總?cè)聘纳铺悄虿〈笫笾車窠?jīng)病變的作用機制研究.pdf

1、目的：觀察番石榴葉總?cè)疲═TPGL）對糖尿病周圍神經(jīng)病變（DPN）大鼠的神經(jīng)功能及形態(tài)學變化、炎癥介質(zhì)表達，考察藥物改善DPN的作用，并通過觀察TTPGL對TNF-αmRNA、IL-6 mRNA、iNOS mRNA表達以及NF-κB路徑上多個蛋白表達的影響，探討TTPGL的作用機制。
　　方法：采用高脂飲食加腹腔注射STZ（35mg/kg）建立糖尿病大鼠模型。將糖尿病大鼠隨機分為5組：TTPGL低、中、高劑量組（30,60,12

2、0mg/kg/d）；模型組（DM）和羅格列酮（RSG,3mg/kg/d）對照組。另取正常大鼠9只，設為正常對照組（Control）。灌胃給藥8周之后，在體測定坐骨神經(jīng)運動傳導速度（MNCV）、感覺傳導速度（SNCV）以及大鼠熱痛閾值；體外對神經(jīng)組織進行HE染色觀察病理學改變，熒光定量法分析組織炎癥介質(zhì)的含量；Real Time-PCR檢測坐骨神經(jīng)組織TNF-αmRNA、IL-6 mRNA和iNOS mRNA的表達量，Western Bl

3、ot檢測Akt、IKKα、p65及其磷酸化蛋白表達。
　　結(jié)果：
　　1.TTPGL對糖尿病大鼠體重及血糖指標的影響
　　實驗第8周時，Control體重由254.5±14.8g增長到490.6±11.0g（Mean±SD），空腹血糖穩(wěn)定在正常水平5.0-6.0mmol/L；與Control組比較，DM組糖尿病大鼠體重明顯減輕，血糖顯著升高(P≤0.01)，整個實驗期間維持在高于15.0mmol/L的高血糖狀態(tài)。

4、>　　2.TTPGL對糖尿病大鼠坐骨神經(jīng)MNCV、SNCV及熱痛閾值的影響
　　與Control組比較，第8周時DM組大鼠坐骨神經(jīng)傳導速度（MNCV、SNCV）顯著性減慢（P≤0.01）；與DM組比較，TTPGL、RSG給藥組糖尿病大鼠的傳導速度顯著提高（P≤0.05）。
　　與Control組相比，DM組大鼠第4周時熱痛閾值無明顯變化。實驗8周時，DM組大鼠熱痛閾值顯著升高（P≤0.01）。與DM組相比，TTPGL、RSG

5、等給藥組在第8周熱痛閾值均表現(xiàn)出顯著性降低，熱敏感度得到一定程度的恢復（P≤0.05）。
　　3.TTPGL對糖尿病大鼠坐骨神經(jīng)炎癥介質(zhì)表達的影響
　　與Control組比較，DM組TNF-αmRNA、IL-6 mRNA和iNOS mRNA炎癥介質(zhì)基因表達顯著增加，TNF-α、IL-6和iNOS含量升高（P≤0.01）；與DM組比較，TTPGL和RSG明顯降低炎癥介質(zhì)的基因表達和含量(P≤0.05或 P≤0.01)。

6、　　4.TTPGL對糖尿病大鼠坐骨神經(jīng)組織形態(tài)學的影響
　　Control組大鼠坐骨神經(jīng)排列有序，髓鞘清晰，組織間致密無水腫且無游離細胞產(chǎn)生；而DM組大鼠坐骨神經(jīng)結(jié)構(gòu)排列紊亂，髓鞘脫落，組織間水腫并游離細胞較多。與DM相比，TTPGL和RSG明顯減輕糖尿病大鼠神經(jīng)組織病理學變化，表現(xiàn)為隨劑量增加神經(jīng)結(jié)構(gòu)排列、組織細胞間的致密程度得到一定程度的改善。
　　5.TTPGL對糖尿病大鼠坐骨神經(jīng)NF-κB介導的信號通路蛋白的影響

7、r>　　與Control組比較，糖尿病模型組大鼠p-Akt/Akt、p-IKKα/IKKα、p-p65/p65含量顯著增加（P≤0.01)，提示糖尿病大鼠NF-κB介導的信號通路蛋白磷酸化活性增強。與模型組相比，TTPGL和RSG可顯著降低上述各蛋白磷酸化活性在糖尿病大鼠坐骨神經(jīng)組織中的表達（P≤0.05或P≤0.01）。
　　結(jié)論：本課題發(fā)現(xiàn) TTPGL具有明顯改善糖尿病周圍神經(jīng)病變的作用，其作用機制可能是通過下調(diào) NF-κB介