早期雷帕霉素干預(yù)對(duì)X射線宮內(nèi)照射所致皮質(zhì)發(fā)育畸形大鼠腦發(fā)育的影響.pdf

1、目的：探索X射線宮內(nèi)照射孕17天大鼠所致子一代(F1)大鼠皮質(zhì)發(fā)育畸形(MCD)的分子機(jī)制，并進(jìn)一步觀察早期雷帕霉素干預(yù)對(duì)該模型中F1MCD大鼠腦發(fā)育的影響及機(jī)制。
　　方法：采用X射線宮內(nèi)照射孕17天大鼠，使孕鼠所產(chǎn)F1大鼠成為MCD模型。隨機(jī)選取健康SD孕期大鼠孕正常組2只，孕雷帕霉素干預(yù)組、孕模型組及孕溶劑組各3只，除孕正常組不做任何處理外，其余各組孕鼠分別于孕17天行195cGy X射線宮內(nèi)照射，孕雷帕霉素干預(yù)組于孕18天

2、進(jìn)行腹腔注射雷帕霉素，溶劑組于孕18天予以腹腔注射溶劑處理，連續(xù)每天注射致產(chǎn)后斷奶（產(chǎn)后21天，共25天），所生F1代大鼠對(duì)應(yīng)選作正常組、雷帕霉素干預(yù)組、模型組及溶劑組，飼養(yǎng)致大鼠成年期（產(chǎn)后77天），然后采用Morris水迷宮檢測(cè)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力，腦電圖監(jiān)測(cè)大鼠大腦癇樣波發(fā)放情況，大體標(biāo)本及病理HE染色觀察大鼠腦組織結(jié)構(gòu)及神經(jīng)元變化，蛋白免疫印跡法檢測(cè)mTOR信號(hào)通路下游蛋白S6的表達(dá)情況，RT-PCR檢測(cè)S6mRNA表達(dá)情況，最后統(tǒng)

3、計(jì)分析并比較各組大鼠各指標(biāo)的異同。
　　結(jié)果：(1)隨著訓(xùn)練時(shí)間的增加，各組大鼠逃生潛伏期均逐漸縮短(p＜0.05);與正常組相比，模型組和溶劑組逃生潛伏期明顯延長，目標(biāo)象限時(shí)間比率明顯縮短，穿越平臺(tái)次數(shù)明顯減少（均p＜0.01），早期雷帕霉素干預(yù)后逃生潛伏期明顯好轉(zhuǎn)(p＜0.05)，穿越平臺(tái)次數(shù)、目標(biāo)象限時(shí)間比率也有好轉(zhuǎn)的趨勢(shì)，模型組和溶劑組各指標(biāo)均無明顯差異（均p＞0.05）。(2)與正常組比較，模型組和溶劑組腦電圖癇樣波發(fā)放

4、頻率明顯增加，波幅增高，而雷帕霉素干預(yù)組可明顯改善癇樣波發(fā)放的頻率和程度(均p＜0.05)，模型組和溶劑組無明顯差異(p＞0.05)。(3)大體標(biāo)本和病理HE染色與正常組比較，模型組和溶劑組大鼠具有腦組織各徑線明顯減小、四疊體暴露、胼胝體缺失、側(cè)腦室擴(kuò)大、皮層結(jié)構(gòu)紊亂、海馬結(jié)構(gòu)中斷及異常結(jié)節(jié)形成、肥大神經(jīng)元等特點(diǎn)。早期使用雷帕霉素干預(yù)后MCD大鼠腦皮層結(jié)構(gòu)紊亂及肥大神經(jīng)元有所改善，海馬結(jié)構(gòu)連續(xù)性恢復(fù)，海馬結(jié)節(jié)消失。(4)與正常組相比，模

5、型組及溶劑組大鼠腦組織mTOR信號(hào)通路異常激活，S6蛋白表達(dá)增加（均p＜0.05），早期使用雷帕霉素干預(yù)后可抑制這種異常激活，使蛋白的表達(dá)下降（均p＜0.05），模型組和溶劑組均無明顯差異（均p＞0.05）。(5)與正常組比較，模型組及溶劑組大鼠的基因水平也發(fā)生相應(yīng)改變，S6mRNA表達(dá)相應(yīng)增加，早期雷帕霉素干預(yù)后，S6mRNA的表達(dá)有所下降，而模型組與溶劑組均無明顯差異（均p＞0.05）。
　　結(jié)論：(1)X射線宮內(nèi)照射孕17天