雷帕霉素對早期糖尿病腎病的保護作用.pdf

1、目的：利用小劑量雷帕霉素治療糖尿病腎病大鼠，以觀察mTOR阻斷劑雷帕霉素對早期糖尿病腎病的保護作用。 方法：清潔級雄性SD大鼠24只，隨機分為正常對照組8只(C組)與糖尿病組16只。糖尿病組大鼠禁食12小時后予1％STZ(臨用前溶于PH4.5檸檬酸緩沖液)75mg/Kg體重一次性腹腔注射，C組大鼠予等體積檸檬酸緩沖液腹腔注射。72小時后，內眥靜脈取血測血糖，以血糖≥16.7mmol/L，尿糖3+～4+為造模成功。將穩(wěn)定成模的糖尿

2、病大鼠按體重隨機分為兩組：糖尿病對照組(DN組)，糖尿病雷帕霉素干預組(DN+RAPA組)。于第五周起DN+RAPA組予雷帕霉素每日灌胃給藥(Img/Kg/d)，C組和DN組以相同體積0.5％羧甲基纖維素溶液灌胃，共干預8周。12周末實驗結束，檢測24小時尿微量白蛋白，體重校正的內生肌酐清除率，腎臟肥大指數(shù)，計算腎小球毛細血管叢的平均直徑、面積、體積及系膜基質擴張指數(shù)，透射電鏡下觀察腎臟超微結構變化，免疫組化及RT-PCR半定量TGFβ

3、1、CTGF、FN mRNA及蛋白的表達。 結果：1.12周末，DN組大鼠較C組大鼠血糖，內生肌酐清除率，24小時尿微量白蛋白排泄率明顯增加，HE染色示腎小球明顯肥大，腎小球毛細血管叢的平均直徑、面積、體積較正常組大鼠增大(P<0.01)，PASM染色示系膜基質擴張指數(shù)較正常組大鼠增大(P<0.01)。電鏡下，DN組大鼠基底膜節(jié)段性增厚，足突廣泛融合。TGFβ1、CTGF、FN mRNA及蛋白的表達較正常組明顯增加。2。DN+R

4、APA組大鼠24小時尿微量白蛋白排泄率，內生肌酐清除率，腎臟肥大指數(shù)較DN組大鼠降低。HE染色示腎小球肥大較DN組減輕，PASM染色示腎小球基底膜增厚、系膜外基質聚集程度較糖尿病組減輕(P<0.01)。免疫組化及RT-PCR半定量顯示TGFβ1、CTGF、FN mRNA及蛋白的表達較DN組明顯下調。 結論：小劑量雷帕霉素治療8周能夠降低早期糖尿病腎病大鼠尿微量白蛋白排泄率，內生肌酐清除率，減輕腎小球肥大，抑制系膜外基質聚集，抑制