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文檔簡介
1、目的:1.檢測各實(shí)驗(yàn)組及對照組Treg細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子Foxp3 mRNA,細(xì)胞因子IL-10 mRNA的表達(dá)水平和IL-10蛋白的表達(dá)水平;探究Treg細(xì)胞是否參與了GD的發(fā)病。2.檢測經(jīng)IL-21刺激后各實(shí)驗(yàn)組和對照組Treg細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子Foxp3 mRNA,細(xì)胞因子IL-10 mRNA的表達(dá)水平和IL-10蛋白的表達(dá)水平。初步探究IL-21調(diào)節(jié)外周血Treg細(xì)胞的表達(dá)在Graves病發(fā)病機(jī)制中的作用。
方法:收集
2、28例初發(fā)Graves病患者(GD)、27例經(jīng)藥物治療后緩解的GD( eGD)患者和24例健康對照者(NC)的外周血,化學(xué)發(fā)光法檢測患者的血清 FT3、FT4、uTSH、TgAb、TPOAb和 TRAb水平。分離實(shí)驗(yàn)對象外周血單個核細(xì)胞(Peripheral blood mononuclear cell, PBMCs),分為IL-21刺激組與非刺激組。實(shí)時熒光定量PCR法檢測Foxp3和IL-10 mRNA的表達(dá)水平;ELISA法檢測細(xì)
3、胞培養(yǎng)上清液中IL-10蛋白表達(dá)水平。
結(jié)果:1. GD組甲功指標(biāo)及TgAb、TPOAb和TRAb的水平與eGD組和NC組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P<0.05);但eGD組甲功指標(biāo)及TgAb、TPOAb和TRAb的水平與NC組比較則差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P>0.05)。2. IL-21刺激前,GD組的Foxp3、IL-10 mRNA和IL-10蛋白的表達(dá)水平較eGD組和NC組均明顯升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P<0.05),
4、但eGD組與NC組比較差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P>0.05)。經(jīng)IL-21刺激后,各組的Foxp3、IL-10 mRNA和IL-10蛋白的表達(dá)水平較刺激前均顯著降低,且GD組較其他組更明顯,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P<0.05)。
結(jié)論:1.在GD組中,Treg細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子Foxp3 mRNA,細(xì)胞因子IL-10 mRNA,IL-10蛋白的表達(dá)水平較eGD組和正常對照組明顯增高,這提示Treg細(xì)胞及下游效應(yīng)分子參與了GD的發(fā)
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