IL-21在單純皰疹性角膜基質(zhì)炎小鼠角膜組織中的表達.pdf

1、目的:研究小鼠單純皰疹性角膜基質(zhì)炎發(fā)生和發(fā)展過程中白細胞介素21(IL-21)在角膜組織中的表達水平，探討IL-21的表達與單純皰疹性角膜基質(zhì)炎疾病程度之間的關(guān)系。
　　 方法:用單純皰疹病毒-1(HSV-1)接種于BALB/c鼠角膜上建立單純皰疹性角膜基質(zhì)炎(HSK)動物模型，分別于接種病毒前和接種病毒后的第1d、3d、7d、14d、21d及28d收集小鼠角膜。免疫熒光：制作小鼠角膜冰凍切片后用激光掃描共聚焦顯微鏡檢測角膜中I

2、L-21的表達，實時熒光定量(Real-time)PCR的方法檢測小鼠角膜中IL-21mRNA的表達，同時，在顯微鏡下觀察小鼠角膜的臨床變化，組織學檢查角膜的病理改變。采用Kruskal-Wills檢驗，Nemenyi法檢驗及Spearson相關(guān)分析進行統(tǒng)計學分析，以P＜0.05作為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結(jié)果:
　　 1、HSV-1感染小鼠的角膜后，82％（37/45）的小鼠自病毒接種后第7d起開始出現(xiàn)角膜基質(zhì)混濁，

3、接種后第14d角膜基質(zhì)完全混濁，混濁的高峰時間為病毒感染后第14-21d，91％(41/45)的小鼠均患上了角膜基質(zhì)炎，28d時開始修復。接種后第14d，組織病理學顯示角膜基質(zhì)層高度水腫、增厚，角膜基質(zhì)內(nèi)大量的炎性細胞浸潤，新生血管增生。
　　 2、免疫熒光：IL-21表達于角膜基質(zhì)層炎性細胞的細胞膜及細胞漿中，表現(xiàn)為較強的紅色熒光，而正常小鼠角膜基質(zhì)層未檢測到紅色熒光。
　　 3、Real-time PCR數(shù)據(jù)顯示：I

4、L-21mRNA在正常角膜組織及接種HSV-1角膜組織中均有表達，接種HSV-1后1d小鼠角膜中IL-21mRNA表達量達到高峰（3.93士0.30），約為正常小鼠角膜的3.93倍，接種HSV-1后21d小鼠角膜中IL-21mRNA表達量最低（1.31士0.05），約為正常小鼠角膜的1.31倍。接種HSV-1后1d，3d，7d，14d角膜中IL-21mRNA相對表達量與0d相比有明顯統(tǒng)計學差異，21d和28d角膜中IL-21mRNA基因